کد مقاله کد نشریه سال انتشار مقاله انگلیسی ترجمه فارسی نسخه تمام متن
1172896 961625 2016 3 صفحه PDF ندارد دانلود رایگان
عنوان انگلیسی مقاله
Use of the human hepcidin gene to build a positive-selection vector for periplasmic expression in Escherichia coli
ترجمه فارسی عنوان
استفاده از ژن هپسیدین انسانی به منظور ایجاد یک بردار انتخاب مثبت برای بیان پری پلاسمی در اشرشیاکلی
کلمات کلیدی
انتخاب مثبت؛ هپسیدین؛ وکتور بیانی؛ کلونینگ
Positive selection; Hepcidin; Expression vector; Cloning
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه شیمی شیمی آنالیزی یا شیمی تجزیه
چکیده انگلیسی


• Periplasmic expression of MBP-Hep25 is toxic for E. coli.
• Using this property, we designed a new positive-selection expression vector.
• Cloning efficiency with this vector was close to 100%.

Recombinant proteins are often produced in the periplasm of Escherichia coli because this facilitates the purification process. The oxidizing environment favors the formation of disulfide bridges. We showed that the periplasmic expression of the human hormone hepcidin 25 (Hep25) fused to the maltose-binding protein (MBP) resulted in cell death. This toxicity was not observed when MBP–Hep25 accumulated in the bacterial cytoplasm, or when Hep25 was addressed to the periplasm without the MBP tag. We then modified the periplasmic expression vector pMALp2E to create pMALp2EH, a positive-selection vector with Hep25 as counterselection gene.

ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Analytical Biochemistry - Volume 500, 1 May 2016, Pages 35–37
نویسندگان
, , , , , , ,