Novel bioassay using Bacillus megaterium to detect tetracycline in milk

Tetracyclines are used for the prevention and control of dairy cattle diseases. Residues of these drugs can be excreted into milk. Thus, the aim of this study was to develop a microbiological method using Bacillus megaterium to detect tetracyclines (chlortetracycline, oxytetracycline and tetracycline) in milk. In order to approximate the limits of detection of the bioassay to the Maximum Residue Limit (100 μg/l) for milk tetracycline, different concentrations of chloramphenicol (0, 1000, 1500 and 2000 μg/l) were tested. The detection limits calculated were similar to the Maximum Residue Limits when a bioassay using B. megaterium ATCC 9885 spores (2.8 × 108 spores/ml) and chloramphenicol (2000 μg/l) was utilized. This bioassay detects 105 μg/l of chlortetracycline, 100 μg/l of oxytetracycline and 134 μg/l of tetracycline in 5 h. Therefore, this method is suitable to be incorporated into a microbiological multi-residue system for the identification of tetracyclines in milk.

ResumenLas tetraciclinas son utilizadas para la prevención y el control de las enfermedades del ganado lechero; los residuos de estos medicamentos pueden ser excretados en la leche. El objetivo de este estudio fue desarrollar un método microbiológico con esporas de Bacillus megaterium para detectar las tetraciclinas en la leche. Con el propósito de aproximar los límites de detección del bioensayo al límite máximo de residuo permitido para tetraciclinas en leche (100 μg/l), se analizaron diferentes concentraciones de cloranfenicol (0, 1.000, 1.500 y 2.000 μg/l). Los límites de detección son similares a sus respectivos límites máximos de residuos cuando se utiliza un bioensayo con esporas de Bacillus megaterium ATCC 9885 (2,8 x 108 esporas/ml) y cloranfenicol (2.000 μg/l). Este bioensayo detectó 105 μg/l de clortetraciclina, 100 μg/l de oxitetraciclina y 134 μg/l de tetraciclina en 5 h. Por lo tanto, este método es adecuado para ser incorporado en un sistema microbiológico multirresiduo para la identificación de tetraciclinas en leche.