Les anticorps dirigés contre la deuxième boucle extracellulaire des récepteurs adrénergiques β1 induisent une dysfonction endothéliale dans l’aorte de rat Wistar

RésuméObjectifÉvaluer l’effet de l’immunisation active, à l’aide d’un peptide correspondant à la deuxième boucle extracellulaire des récepteurs adrénergiques (RA) β1, sur la réactivité de l’aorte isolée de rat Wistar.MéthodesDes rats Wistar âgés de neuf semaines ont été activement immunisés pendant trois mois avec un peptide correspondant à la deuxième boucle extracellulaire des RA β1 humains. Les immunoglobulines G (IgG) spécifiques ont été caractérisées par Elisa et quantifiées par la méthode BCA. Leur fonctionnalité a ensuite été testée dans des cardiomyocytes ventriculaires isolés (CVI). Des anneaux d’aorte de rats témoins ou immunisés ont été montés dans des cuves à organes isolés. Ensuite, des courbes de contraction à la phényléphrine (1 nM à 300 μM) ou de relaxation à l’acétylcholine (1 nM à 100 μM) et l’isoprénaline (1 nM à 30 μM) ont été établies.RésultatsDans les CVI, les IgG anti-RA β1 (10 ou 25 μg/mL) induisent une augmentation du raccourcissement cellulaire dépendante de la concentration. L’effet inotrope positif induit par l’isoprénaline (10 nM et 1 μM) est fortement réduit dans les CVI incubés en présence de 25 μg/mL d’IgG pendant trois heures. Dans l’aorte de rats immunisés, la contraction à la phényléphrine et la relaxation à l’acétylcholine sont significativement altérées. En revanche, la relaxation induite par l’isoprénaline est conservée.ConclusionsCette étude confirme que les anticorps dirigés contre la deuxième boucle extracellulaire des RA β1 induisent un effet inotrope positif dans les cardiomyocytes isolés de rat adulte. Elle montre aussi, pour la première fois, que les rats immunisés présentent une altération de la fonction endothéliale, mais une conservation de la relaxation adrénergique β.

PurposeTo evaluate the effect of active immunization with a peptide corresponding to the second extracellular loop of the human beta1-adrenoceptors (β1-AR) on the reactivity of Wistar rat isolated aorta.MethodsNine-week-old Wistar rats were actively immunized for 3 months with a peptide corresponding to the second extracellular loop of the human β1-AR. Specific immunoglobulins G (IgG) were characterized by Elisa and the bicinchonic acid protein assay and their functionality were tested in isolated ventricular cardiomyocytes (IVC) from control rats. Aortic rings isolated from control or immunized rats were mounted in organ baths. Then, contractile curves to phenylephrine (1 nM to 300 μM) and relaxant curves to acetylcholine (1 nM to 100 μM) and isoprenaline (1 nM to 30 μM) were established.ResultsCell shortening increased dose-dependently in rat IVC superfused with IgG containing β1-AR antibodies (10 or 25 μg/mL). Isoprenaline-induced positive inotropy was strongly reduced in IgG containing β1-AR antibodies preincubated (3 h) IVC. Phenylephrine–and acetylcholine–induced aortic responses were greatly inhibited in immunized rats compared to control ones. However, active immunization did not influence the isoprenaline-mediated relaxation.ConclusionsThe present work confirms that β1-AR antibodies directed against the second extracellular loop of β1-AR induce a positive inotropic effect in adult rat IVC. Moreover, we demonstrated, for the first time, that 3-month immunization with β1-AR peptide was associated with altered aortic endothelial function without change in the β-AR-mediated vasorelaxation.