An in vivo procedure to evaluate antifungals agents on Malassezia pachydermatis in dogs: example with a piroctone olamine containing shampoo

Objective. – The first objective of the present study was to develop an in vivo procedure as a possible model to evaluate the activity of topical antifungal agents against Malassezia pachydermatis. The second objective was to apply this procedure to assess the antifungal properties of a shampoo containing piroctone olamine.Materials and methods. – Twenty beagle dogs, maintained in laboratory conditions, were divided in two equivalent groups (treated and untreated) based on initial counts of spontaneous Malassezia pachydermatis populations on skin and ear canals. The treated group received one application of a shampoo containing piroctone olamine on the ventral neck and ear canals were filled with diluted shampoo. Samples for fungal cultures were taken from skin and ear canals on days 0 (before treatment), 1–2 and 4 and then cultured on modified Sabouraud's agar. On day 7 the number of colony forming units of Malassezia pachydermatis (CFU) on cultures was counted.Results. – The present study demonstrated: (i) the value of an original procedure for evaluating in a group of laboratory dogs the in vivo activity of anti-Malassezia topical products under controlled experimental conditions; (ii) the CFU counts at the three sites progressively decreased in the treated group from D 0 to D 4 while they remained constant in the non-treated group.Analysis of variance showed a significant interaction effect between treatment and time at the left ear site (P < 0.01). The antifungal effect was maintained at least 4 days.Conclusion. – The three sites chosen, ear canals and ventral neck, in groups of healthy dogs, can be used to evaluate the evolution of resident populations of Malassezia pachydermatis. The results of this study indicated also an unexpected prolonged antifungal effect obtained with a shampoo containing piroctone olamine that could be of interest when Malassezia overgrowth is observed in dogs.

RésuméObjectif. – Le premier objectif de cette étude est de développer une activité in vivo permettant d'évaluer l'efficacité de topiques antifongiques vis-à-vis de Malassezia pachydermatis chez le chien. Le second objectif est d'appliquer cette activité pour mesurer l'activité antifongique d'un shampooing contenant de la piroctone olamine.Matériel et méthodes. – Vingt beagles de laboratoire sont répartis en deux groupes en fonction de leurs populations cutanées et auriculaires naturelles de Malassezia. Le groupe traité reçoit une application cutanée d'un shampooing contenant de la piroctone olamine et les conduits auditifs sont baignés par le shampooing dilué. Des prélèvements pour cultures mycologiques sont effectués à partir de la peau et des conduits auditifs aux jours j0 (avant l'application), 1,2 et 4, et mis en culture sur gélose de Sabouraud. Au septième jour de culture le nombre d'unités formant colonies de M. pachydermatis (UFC) est dénombré sur chaque culture.Résultats. – La présente étude montre : 1) l'intérêt d'une procédure originale in vivo pour l'évaluation de l'activité de topiques à activité anti-Malassezia en conditions expérimentales contrôlées ; 2) la diminution progressive du nombre de CFU pour les trois sites cutanés dans le groupe traité de j0 à j4 tandis qu'ils demeurent stables dans le groupe témoin non traité. L'analyse de variance montre une interaction statistiquement significative dans le temps liée au traitement dans le conduit auditif externe gauche (p < 0,01). L'effet antifongique persiste au moins quatre jours.Conclusion. – Les trois sites choisis, conduits auditifs et peau du cou, sur des groupes de chiens sains, peuvent être utilisés pour évaluer l'évolution de populations de M. pachydermatis. Les résultats de cette étude montrent aussi un effet antifongique prolongé inattendu faisant suite à l'application d'un shampooing contenant de la piroctone olamine qui pourrait trouver un intérêt lorsqu'une prolifération de Malassezia est observée chez le chien.