Testing toxicity of multiple intravitreal injections of bevacizumab in rabbit eyes *

Objective: To evaluate the potential toxicity of repeated intravitreal injections of bevacizumab in rabbit eyes.Design: Randomized, placebo-controlled experimental animal study.Participants: Fourteen chinchilla rabbits; 12 assigned to the experimental group and 2 assigned to the normal control group.Methods: Three sequential, biweekly, intravitreal injections of bevacizumab in doses of 2.5 mg/0.1 mL or 5.0 mg/0.2 mL were performed on each rabbit. Evaluations included intraocular pressure (IOP), aqueous flare, B-scan ultrasound, fundus photography, ultrasound biomicroscopy, electroretinography (ERG), and visually evoked potentials (VEPs) performed at baseline and during the follow-up period. The eyes were enucleated at 1 week and 4 weeks after the last intravitreal injection, and underwent light and electron microscopic evaluations, as well as testing for apoptotic activity.Results: After intravitreal injections, no changes were found by regular clinical observation and IOP tests. There was no significant difference in the anterior chamber inflammatory activity evaluated by the laserflare meter. No evidence of retinal toxicity was seen after intravitreal bevacizumab at doses of 2.5 and 5.0 mg by either ERG or flash VEPs. Electron microscopy did show the presence of inflammatory cells and some ultrastructural changes in the photo-receptor cells in the 5.0 mg experimental group 1 week after the third injection. Mild to moderate apoptosis of photoreceptors was detected in the 5.0 mg group at the same time.Conclusions: The biweekly, multiple intravitreal injections of bevacizumab did not result in evidence of toxicity in regular clinical and functional observations at both 2.5 mg and 5.0 mg doses. The 5.0 mg dose may induce transient inflammation, ultrastructural abnormalities, and apoptosis.

RésuméObjet: Évaluation de la possibilité de toxicité émanant de la répétition des injections intravitréennes de bévacizumab dans les yeux de lapin.Nature: Étude expérimentale animale randomisée avec placébo.Participants: Quatorze lapins chinchillas, soit 12 formant le groupe expérimental et 2, le groupe témoin.Méthodes: Trois injections intravitréennes consécutives et bihebdomadaires ont été administrées en doses de 2,5 mg/0,1 mL ou 5,0 mg/0,2 mL à chaque lapin. Les évaluations ont compris la pression intraoculaire (PIO), la poussée aqueuse, l’examen à l’ultrason B, la photographie du fond d’œil, l’électrorétinographie (ERG) et les potentiels évoqués visuels (PEV) effectués au départ et pendant le suivi. Les yeux ont été énucléés 1 semaine et 4 semaines après la dernière injection intravitréenne; ils ont fait l’objet dévaluations microscopiques à la lumière et électronique et subi des tests d’activité apoptotique.Résultats: Après les injections intravitréennes, l’observation clinique régulière et les tests de PIO n’ont fait voir aucun changement. Il n’y avait pas d’écart significatif dans l’activité inflammatoire de la chambre anterieur au « laser flare meter ». Ni l’ERG ni le flash PEV n’ont révélé d’évidence de toxicité rétinienne après l’administration intravitréenne de doses de 2,5 et 5,0 mg de bévacizumab. La microscopie électronique a montré la présence de cellules inflammatoires et quelques changements ultrastructurels dans les cellules photoréceptrices du groupe expérimental de 5,0 mg une semaine après la troisième injection. Des apoptoses faibles à moderées des photorécepteurs ont été détectées en même temps dans le groupe des 5,0 mg.Conclusions: Les injections intravitréennes multiples et bihebdomadaires de bévacizumab, en doses de 2,5 et 5,0 mg, n’ont pas entraîné d’évidence de toxicité lors des observations régulières, cliniques et fonctionnelles. La dose de 5,0 mg peut cependant occasioinner une inflammation passagère, des anomalies ultrastructurelles et une apoptose.