Molecular and serological diagnosis of Chikungunya virus infection

IntroductionIn 2005–2006, during the Chikungunya virus outbreak in La Réunion (Indian Ocean), we urgently established the molecular and serological methods for the diagnosis of Chikungunya virus (CHIKV) from various types of samples.MethodsCHIKV RNA was detected using a highly sensitive real-time RT PCR assay. A co-extracted and co-amplified internal control RNA was used to identify RT PCR inhibitors. Depending on their nature samples were pretreated before nucleic acid extraction. Viral loads were measured using a synthetic RNA calibrator. CHIKV immunoglobulin (Ig) G and M antibodies were detected by ELISA either from sera or from blood absorbed on filter paper.ResultsCHIKV RNA was found in various types of samples such as plasma, cerebrospinal fluid, and placenta, but was not found in some samples including maternal milk and synovial samples. Detection of IgG from filter paper absorbed blood is specific and sensitive. Routine data showed that maternally transferred IgG and naturally acquired IgM persist at least 12 and 18 months, respectively.DiscussionThe techniques enabled the diagnosis of chikungunya in known and newly described forms of the disease. They are used for routine diagnosis and large scale surveys.

RésuméIntroductionAu cours de l'épidémie à virus chikungunya (CHIKV) à La Réunion (Océan Indien) en 2005–2006, nous avons adapté dans l'urgence les méthodes moléculaire et sérologique pour le diagnostic dans diverses natures de prélèvements.MéthodesL'ARN CHIKV est détecté par une technique RT PCR en temps réel très sensible. Un ARN contrôle interne est coextrait et coamplifié afin d'identifier les inhibiteurs de la RT PCR. Selon sa nature, l'échantillon est prétraité avant d'extraire les acides nucléiques. Un ARN synthétique permet la mesure de la charge virale. Les immunoglobulines (Ig) G et M sont détectées par Elisa dans le sérum ou le sang total déposé sur papier buvard.RésultatsL'ARN CHIKV a été détecté dans divers prélèvements tels que plasma, liquide céphalorachidien ou placenta. Il n'a pas été trouvé dans le lait maternel et les prélèvements synoviaux, en particulier. La détection des IgG dans le sang absorbé sur papier buvard est spécifique et sensible. Les données du laboratoire montrent que les IgG transmises par la mère peuvent persister au moins 12 mois, et les IgM acquises au moins 18 mois.DiscussionLes techniques permettent de diagnostiquer le chikungunya dans ses formes connues ou nouvellement décrites, et sont utilisées pour le diagnostic de routine et les enquêtes à grande échelle.