Évaluation de la quantification du cytomégalovirus dans le sang par le test de PCR en temps réel CMV R-gene®

RésuméBut de l’étudeLe diagnostic de maladie à cytomégalovirus (CMV) chez le patient immunodéprimé est souvent réalisé par PCR quantitative (Q-PCR) dans le sang bien que la méthode de référence reste l’antigénémie pp65.ObjectifsDéfinir la valeur prédictive de la Q-PCR par le test CMV R-gene® pour le diagnostic de maladie à CMV et le suivi de l’efficacité du traitement. Comparer les résultats de la Q-PCR à ceux de l’Ag-pp65 et la faisabilité des deux techniques.Patients et méthodesLa Q-PCR a été réalisée sur des prélèvements de sang total congelés à −80 °C (n = 34) de cinq patients avec un diagnostic de maladie à CMV définie par la présence de signes cliniques évocateurs et une Ag pp65 supérieure à deux noyaux. Après extraction, l’ADN a été quantifié dans chaque échantillon par la Q-PCR quantitative CMV R-gene® selon les recommandations du fabricant. La détection de l’Ag pp65 CMV avait été réalisée avec le réactif CINAkit® (Argene) lors de la réception du prélèvement pour 32 échantillons.RésultatsTous les échantillons positifs en Ag pp65 sont positifs en PCR (n = 16). Six échantillons négatifs en Ag pp65 sont positifs en PCR. Les dix autres échantillons sont négatifs par les deux techniques. Les cinétiques des deux marqueurs sous traitement sont superposables.ConclusionLe test CMV R-gene® a une aussi bonne valeur prédictive que l’Ag-pp65 tout en étant une technique rapide, et plus facile d’utilisation. Une étude prospective sur un plus grand nombre de patients est nécessaire pour définir le seuil de prédiction de maladie à CMV.

Aim of the studyDiagnosing the presence of cytomegalovirus (CMV) in the blood of immunodepressed patients is often done by quantitative polymerase chain reaction (Q-PCR) even though the reference method remains the antigenemia pp65 (Ag-pp65) test.ObjectivesTo define the predictive value of the Q-PCR in the diagnosis of CMV disease and assess treatment efficacy using the CMV R-gene® test. To compare the Q-PCR results and feasibility with those of the Ag-pp65 test.Patients and methodsThe Q-PCR was performed in 34 whole blood samples (frozen at −80 °C until use) from five patients diagnosed with CMV disease, defined as the presence of clinical signs and Ag-pp65 in the nuclei of more than two cells. After extraction, viral DNA was quantified in each sample using the Q-PCR CMV R-gene® kit according to the manufacturer's instructions. Immediately after blood was drawn, the Ag-pp65 test had been performed in 32 samples using CINAkit® (Argene).ResultsThe 16 samples positive by the Ag-pp65 test were also positive by PCR; six samples negative by the Ag-pp65 test were positive by PCR; and the remaining 10 samples were negative by both techniques. During treatment, the two markers’ kinetics were similar.ConclusionThe CMV R-gene® test has a predictive value as good as that of the Ag-pp65 test but is fast and easier to use. A prospective study with a greater number of patients is needed to define the prediction threshold for CMV disease.