Évaluation de l'antibiogramme par diffusion en milieu gélosé pour le dépistage de souches de Clostridium difficile de sensibilité diminuée aux antibiotiques

RésuméBut de l'étudeActuellement, la sensibilité de Clostridium difficile aux antibiotiques n'est pas déterminée de façon systématique. Le but de ce travail est d'évaluer la fiabilité de l'antibiogramme par diffusion en milieu gélosé pour dépister les souches de C. difficile de sensibilité diminuée aux antibiotiques.MéthodesAu total, 36 souches de C. difficile (toxinogènes ou non) isolées en 2005 et 2006 dans trois hôpitaux parisiens APHP (Jean-Verdier, René-Muret, Beaujon) ont été analysées pour leur sensibilité vis-à-vis de 14 antibiotiques. Les antibiogrammes ont été réalisés à partir d'un inoculum de 1 McFarland sur un milieu Mueller-Hinton additionné de sang (Bio-Rad*).RésultatsLa diminution de sensibilité (I + R) observée est de 40 % pour amoxicilline–acide clavulanique, 60 % pour pipéracilline–tazobactam, 100 % pour la ceftriaxone, 81 % pour l'imipénème, 61 % pour l'ertapénème, 2 % pour le chloramphénicol, 34 % pour l'érythromycine, 90 % pour la lincomycine, 2 % pour le linézolide, 98 % pour la lévofloxacine, 17 % pour la moxifloxacine et 0 % pour vancomycine, teicoplanine et métronidazole. Pour vérifier la validité des résultats obtenus par l'antibiogramme par diffusion en milieu gélosé, les concentrations minimales inhibitrices (CMI) ont été déterminées respectivement par la technique du E-test pour les glycopeptides et le métronidazole (E-test préalablement validé pour ces antibiotiques), par la méthode de référence par dilution en milieu gélosé et par le E-test pour les nouvelles molécules à activité potentielle sur les anaérobies : ertapénème, imipénème, linezolide et moxifloxacine.ConclusionL'antibiogramme par diffusion apparaît valable pour suspecter des souches de sensibilité diminuée et limiter la détermination de la CMI.

AimIn vitro determination of Clostridium difficile susceptibility to antibiotics is not routinely performed. The aim of this study was to evaluate the performance of antibiotic susceptibility determination with the disk diffusion method for screening C. difficile isolates with decreased susceptibility to antibiotics.MethodsThirty-six C. difficile isolates (toxigenic or not) isolated in 2005 and 2006 from three hospitals Assistance publique–Hôpitaux de Paris (Jean-Verdier, René-Muret, Beaujon) were studied by disk diffusion method with 14 antibiotics. Mueller-Hinton agar supplemented with sheep blood (Bio-Rad*) were swabbed with a C. difficile suspension at 1 McFarland. To check the results obtained with the disk diffusion method, Minimal Inhibitory Concentration (MIC) were performed respectively with E-test for glycopeptides and metronidazole and with the agar dilution reference method and E-test for new molecules with a potential activity against anaerobes: imipenem, ertapenem, linezolid and moxifloxacin.ResultsThe decreased susceptibility (resistant and intermediate) observed was 40% for amoxicillin–clavulanate, 60% for piperacillin–tazobactam, 100% for ceftriaxone, 81% for imipenem, 61% for ertapenem, 2% for chloramphenicol, 34% for erythromycin, 90% for lincomycin, 2% for linezolid, 98% for levofloxacin, 17% for moxifloxacin and 0% for vancomycin, teicoplanin and metronidazole. The results obtained with the disk diffusion method were compared to MICs obtained with E-test and reference method.ConclusionThe disk diffusion method seems to be a good method to detect isolates suspected to have a decreased susceptibility and consequently to reduce MIC determinations.