Detection of M2 antimitochondrial antibodies by dot blot assay is more specific than by enzyme linked immunosorbent assay

AimsThe objective of our study was, in one hand, to determine the sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) of ELISA and dot blot assay to investigate IgG M2 antimitochondrial antibodies (M2 AMA) and, on the other hand, to compare these results with those of indirect immunofluorescence technique (IIF).MethodsSera from patients suffering from primary biliary cirrhosis (PBC) (n = 55), systemic lupus erythematosus (n = 21), celiac disease (n = 30) and blood donors (n = 75) were analyzed. M2 AMA were detected by ELISA and dot blot using pyruvate dehydrogenase purified from porcine heart and by IIF on cryostat sections of rat liver-kidney-stomach.ResultsIIF was more sensitive (98%) than ELISA (93%) and dot blot (91%). The specificity of AMA for PBC using IIF, ELISA and dot blot reached 100%, 92% and 100%, respectively. The PPV of IIF, ELISA and dot blot was 100%, 93% and 100%, respectively. The NPV was 98% for IIF, 92% for ELISA and 91% for dot blot.ConclusionDot blot, using purified pyruvate dehydrogenase, had a higher specificity than ELISA and may be useful in confirming the specificity of AMA in cases of doubt with IIF.

RésuméL’objectifDe notre travail consiste d’une part à déterminer la sensibilité, la spécificité et les valeurs prédictives positive (VPP) et négative (VPN) de la technique Elisa et de la technique dot blot pour la recherche des anticorps antimitochondries de type M2 et d’autre part, de comparer ces résultats à ceux de la technique d’immunofluorescence indirecte (IFI).Matériel et méthodesNotre étude a porté sur 55 sérums de patients atteints de cirrhose biliaire primitive (CBP), 21 sérums de patients atteints de lupus érythémateux systémique, 30 sérums de patients atteints de maladie coeliaque et 75 sérums prélevés chez des donneurs de sang. La recherche des anticorps antimitochondries de type M2 a été effectuée par les techniques Elisa et dot blot utilisant la pyruvate déshydrogénase extraite a partir du cœur de porc et par IFI sur coupes de tissus de rein/foie/estomac de rat.RésultatsLa sensibilité de la technique IFI (98 %) est supérieure à celle de la technique Elisa (93 %) et à celle de la technique dot blot (91 %). La spécificité des techniques IFI, Elisa et dot blot est de 100, 92 et 100 % respectivement. La VPP des techniques IFI, Elisa et dot blot est 100, 93 et 100 % respectivement. La VPN est de 98 % pour la technique IFI, 92 % pour L’Elisa et 91 % pour la technique dot blot.ConclusionLa technique dot blot utilisant la pyruvate déshydrogénase purifiée possède une spécificité meilleure que la technique Elisa et pourrait être utile pour confirmer la spécificité de l’IFI dans les cas douteux.