Resistance to antibiotics in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa

ObjectivesTo analyse the global resistance to some antibiotics used to treat nosocomial infections by Pseudomonas aeruginosa, specially to carbapenems, and its relationship with the presence of carbapenemases, OXA, VIM and IMP.MethodsThe study included 229 P. aeruginosa isolates from a Hospital in Northern Spain (year 2002). Susceptibility to antimicrobial agents was determined by the analysis of the MIC. Genetic typing was carried out by RAPD-PCR fingerprinting with primer ERIC-2. Genetic experiments to detect class-1 integrons were performed by PCR with primers 5′CS and 3′CS. Detection of carbapenemases was done by phenotypic (Hodge test and DDST) and genotypic methods (PCR with primers for imp, vim1, vim2 and oxa40 genes).Results23.9% of isolates were resistant to ceftazidime, 35.9% to cefotaxime, 5.3% to amikacin, 54.9% to gentamicin, 14.6% to imipenem and 6.6% to meropenem. Isolates resistant to imipenem (33) were furtherly tested. Genetic typing didn't show clonal relatedness among the most of the isolates. Class-1 integrons were present in most isolates (sizes 600–1700 bp). Phenotypic methods for carbapenemases showed 5 positive isolates. Genotypic methods showed the presence of two isolates with the oxa40 gene.ConclusionsMeropenem, amikacin and imipenem were the most active agents to treat infections caused by Pseudomonas aeruginosa. In our study, the presence of carbapenemase enzymes wasn't high. Phenotypic tests cannot be considered as accurate screening tool to detect carbapenemases. This is the fist report of the oxa40 gene in Pseudomonas aeruginosa isolates.

RésuméBut de l'étudeL'analyse de la résistance globale aux quelques antibiotiques employés dans le traitement des infections nosocomiales par Pseudomonas aeruginosa, particulièrement aux carbapénèmes, et la relation avec la présence de carbapénèmases, OXA, VIM et IMP.MéthodesL'étude inclut 229 isolats obtenus d'un hôpital du nord d'Espagne (année 2002). La sensibilité aux antibiotiques a été réalisée par la détermination de la MIC; le typage moléculaire des souches résistantes à l'imipénème par PCR (amorce ERIC-2); la détection d'intégrons par PCR (amorces 5′CS et 3′CS) ; et l'analyse de carbapénèmases par des techniques phénotypiques (Hodge et DDST), et génotypiques (PCR-amorces pour les genes imp, vim1, vim2 et oxa40).Résultats23,9 % des souches étaient résistantes à la ceftazidime, 35,9 % à la céfotaxime, 14,6 % à l'imipénème, 6,6 % au méropénème, 5,3 % à l'amikacine, et 54,9 % à la gentamycine. Le typage moléculaire n'a pas montré de relation génotypique entre les souches résistantes à l'imipénème. La plupart des souches portaient des intégrons de classe 1 (600–1700 pb). Cinq isolats ont montré un résultat positif avec les techniques phénotypiques pour la détection de carbapénèmases. Les techniques génotypiques ont montré deux isolats avec le gène oxa40.ConclusionLe méropénème, l'amikacine et l'imipénème sont les agents les plus actifs pour traiter des infections par Pseudomonas aeruginosa. Dans cette étude la présence de carbapénèmases n'a pas été haute. Les techniques phénotypiques ne peuvent pas être considérées comme une bonne méthode pour la détection de carbapénèmases. C'est la première notification du gène oxa40 dans des isolats de Pseudomonas aeruginosa.