Genotype MRSA, a new genetic test for the rapid identification of staphylococci and detection of mecA gene

Early detection of Staphylococcus methicillin resistance (MR) is essential. However MR determination may be difficult because it is necessary to perform investigation of heterogenous resistance and low level of resistance and to discriminate between oxacillin resistance and borderline resistance. Several phenotypic methods are recommended but they fail to detect low level of production de PBP2a, the modified Penicillin Binding Protein responsible for MR. Detection of mecA gene, the gene encoding PBP2a, using PCR is considered to be the reference method. We evaluated Genotype® MRSA, a new rapid system based on DNA multiplex amplification and further hybridisation, for the identification of staphylococci and detection of the mecA gene. The study was performed on a collection of various Staphylococcus strains (N = 30) from clinical human isolates including S. aureus MR and methicillin susceptible (MS), S. epidermidis MR and MS, and other species of coagulase negative Staphylococcus (CNS) MR and MS. For all the strains, the hybridization banding pattern obtained using Genotype® MRSA correlated with their expected phenotypic and genotypic characteristics. Genotype® MRSA allows the identification of the mecA gene as well as S. aureus and S. epidermidis specific genes. This DNA strip technology based assay can easily be incorporated into routine diagnostics. In addition, the short testing time (less than 2 hours) optimises treatment orientation. Genotype® MRSA completely complies with all requirements for a fast, safe, valid and cost-effective MR diagnosis in staphylococci.

RésuméIl est essentiel de connaître au plus tôt la résistance à la méticilline (RM) des staphylocoques. Toutefois la détermination de la RM est difficile en raison de l'existence du phénomène d'hétérorésistance, des bas niveaux de résistance et de la distinction entre la RM et une production excessive de pénicillinase (effet borderline). Plusieurs méthodes phénotypiques sont recommandées, cependant elles sont parfois défaillantes pour détecter les bas niveaux de production de la PLP2a, la protéine de liaison de la pénicilline anormale responsable de la RM. La détection du gène de la PBP2a, le gène mecA, est considérée comme la méthode de référence. Nous avons évalué le test Genotype® MRSA, un nouveau système fondé sur l'amplification génique suivie d'une hybridation permettant d'identifier les staphylocoques et de détecter le gène mecA. L'étude a été réalisée sur une collection de 30 isolats cliniques de staphylocoques comprenant des souches de S. aureus sensibles et résistantes à la méticilline (SM et MR) et des souches de staphylocoques à coagulase négative SM et MR. Pour toutes les souches les résultats obtenus avec le test Genotype® MRSA correspondaient à leurs caractéristiques phénotypiques et génotypiques. Par sa technologie, ce test en bandelette prend place facilement dans la routine d'un laboratoire médical. De plus, le délai de réponse très court, inférieur à deux heures, optimise l'orientation thérapeutique.