Electron microscopy approach for the visualization of the epithelial and endothelial glycocalyx

Cette étude présente un protocole expérimental pour la visualisation du glycocalyx en microscopie électronique. Le glycocalyx est un réseau tridimensionnel principalement composé de glycoprotéines, glycolipides et protéoglycanes associés à la membrane plasmique. Il suscite depuis moins d'une décennie d'un regain d'intérêt en raison de son rôle majeur dans la physiologie et pathologie vasculaire. Dès lors la visualisation du glycocalyx requiert des techniques adaptées car sa préservation reste difficile, dû à son organisation fragile qui reste particulièrement sensible aux différentes étapes de préparation pour la microscopie électronique. Dans cette étude, la fixation chimique par perfusion a été réalisée et reste une bonne alternative à la fixation conventionnelle par immersion. La supplémentation de la solution de fixation par le nitrate de lanthane permet de réhausser le contraste du glycocalyx en microscopie électronique transmission champ clair et d'utiliser la diffusion élastique des électrons pour son observation en contraste chimique (STEM-HAADF).