Dosage de l’activité toxine botulique : vers un nouveau dosage sur culture cellulaire ?

RésuméLe mode de qualification des lots de toxine botulique (BoTx) injectés est la dose léthale 50 souris, qui ne permet cependant pas de déterminer des unités toxine en termes d’efficacité thérapeutique.But de l’étudeLe but de cette recherche était d’étudier les effets de différentes doses de la BoTx sur une culture de neurones.Matériel et méthodeNous avons analysé les effets de la BoTx A dans une culture de neurones glutamatergiques de cervelet de rat. Nous avons étudié les effets de l’intoxination par des doses croissantes en dosant le glutamate libéré après dépolarisation et en analysant par western blot le clivage de la cible de la toxine.RésultatCe mode d’analyse nous a permis d’établir des courbes de type dose réponse pour le glutamate libéré. Le blocage de la libération de glutamate correspondait pour les mêmes doses de toxine au clivage du substrat tel que le montre l’analyse par western blot.ConclusionCe mode de qualification peut constituer un premier jalon dans la mise au point d’un mode d’analyse du profil pharmaceutique de différents lots de BoTx.

SummaryThe actual gold standard of Botulin A toxin (BoTx A) batches qualification is the mouse lethality assay. With this assay it is nevertheless impossible to set a therapeutic value unit.AimsThe goal of this research was to study the effects of BoTx A increasing concentrations on glutamatergic rat neurons.Experimental procedureWe studied the glutamate release with increasing concentrations of BoTx A. We also studied the BoTx A target cleavage with a western blot technique.ResultsOur results proved that it is possible to establish a dose-response – like curve of BoTx A effects on glutamate release. Moreover the cleavage of the target protein was visible for the same toxin concentrations that inhibited the glutamate release.ConclusionThis technique could be the first step toward a new way of setting a better pharmaceutical profile for toxin batches.