| Article ID | Journal | Published Year | Pages | File Type |
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| 3401159 | Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica | 2014 | 6 Pages |
Metallo-β-lactamase (MBL)-producing gram-negative bacteria are an increasing public health concern worldwide. Screening tests for the rapid and specific identification of these pathogens are essential, and should be included among routine diagnostics in laboratories. This study aimed to determine the MBL frequency among carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates, and to evaluate the accuracy of different tests in screening for MBL production. From January 2001 to December 2008, a total of 142 imipenem-non-susceptible P. aeruginosa strains were isolated from distinct clinical samples from hospitalized patients. These isolates were examined by PCR, MBL E-test, double-disk synergy test (DDST), and combined disk (CD) test. The minimal inhibitory concentration (MIC; μg/mL) was determined by agar dilution, and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) was performed on all samples. Sequencing was performed to confirm and define the MBL variant and subtype. Using PCR and DNA sequence analysis, 93 strains were confirmed positive for MBLs, 91 strains for the blaSPM-1 gene, 1 strain for the blaIMP-1 gene, and 1 strain for the blaIMP-16 gene. PFGE displayed a clonal pattern. The sensitivities, specificities, positive and negative predictive values were evaluated for all tests. The DDST assay (CAZ-MPA) was the optimal method for screening MBL production in P. aeruginosa strains. However, the results of the CD assay (IMP/EDTA) showed close agreement with those of the DDST. In addition, the CD assay allowed a more objective interpretation and did not require the use of a toxic substance.
ResumenLas metalo-β-lactamasas (MBL) que producen las bacterias gram-negativas son un creciente problema de salud pública en todo el mundo. Las pruebas de detección para la identificación rápida y específica de estos patógenos son esenciales y deben ser incluídas entre los diagnósticos de rutina de los laboratorios. Este estudio tiene como objetivo determinar la frecuencia de MBL en aislamientos de Pseudomona aeruginosa resistentes a carbapenem y evaluar la precisión de diferentes pruebas en la detección de la producción de MBL. Entre enero de 2001 y diciembre de 2008 un total de 142 cepas de P. aeruginosa no susceptibles a imipenem fueron aisladas de muestras clínicas provenientes de pacientes hospitalizados. Estas cepas fueron examinadas por PCR, prueba de MBL-E, prueba de sinergia de doble disco (DDS), y prueba de disco combinado (DC). La concentración inhibitoria mínima (CIM; g/ml) se determinó mediante dilución en agar. Se realizó electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) a todas las muestras. La secuenciación se realizó para confirmar y definir la variante de MBL y subtipo. Por PCR y análisis de secuencia de ADN, 93 cepas fueron confirmadas como positivas para MBL. A su vez, 91 cepas fueron confirmadas para el gen blaSPM-1, 1 cepa para el gen bla IMP-1, y 1 cepa para el gen bla IMP-16. La prueba de PFGE muestra un patrón clonal. Se evaluó la sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivos y negativos para todas las pruebas. El ensayo DDS (CAZ-MPA) fue el método óptimo para la detección de la producción de MBL en las cepas de P. aeruginosa. Sin embargo, los resultados del ensayo de DC (IMP/EDTA) mostraron una estrecha concordancia con los de la DDS. Adicionalmente, el ensayo de DC permitió una interpretación más objetiva de los resultados, no requiriendo el uso de una sustancia tóxica.
