Liquid chromatography and tandem mass spectrometry method for quantitative determination of pioglitazone and its metabolite 5-hydroxy pioglitazone in human plasma

Une méthode par chromatographie tandem liquide-spectrométrie de masse (LC-MS/MS) a été développée pour l'estimation simultanée de la pioglitazone (PIO) et de ses métabolites actifs dans le plasma humain pour l'application à des études pharmacocinétiques. La séparation chromatographique a été réalisée sur la phase inverse Peerless Basic C18 avec une colonne (100 × 4,6 mm, 5 μm) à une température de colonne de 40 °C, en utilisant une phase mobile binaire méthanol : acétate d'ammonium 5 mM dans de l'acide formique à 0,1 % (80:20, v/v). La séparation a été effectuée à un débit de 1 mL/min et l'injection de l'échantillon était de 10 μL. La pioglitazone D4 (IS1) et 5-hydroxy pioglitazone M-IV D4 (IS2) ont été utilisées comme étalons internes. La linéarité de la méthode a été validée sur la plage de 6,04-1503,21 ng/mL pour la pioglitazone et 6,01 à 1496,28 ng/mL pour l'hydroxy pioglitazone (HPIO). Les coefficients moyens d'extraction dans du plasma additionné ont été de 94,92 % pour la PIO et 96,13 % pour la HPIO. La méthode développée peut être utilisée avec succès chez des volontaires humains sains pour étudier le profil pharmacocinétique de la pioglitazone.