Promotion of immunity of mice to Pasteurella multocida and hog cholera vaccine by pig interleukin-6 gene and CpG motifs

A novel oligodeoxynuleotides containing 11 CpG motifs was synthesized and inserted into the VR1020 plasmid containing pig interleukin-6 (IL-6) gene (VPIL6) to construct recombinant plasmid, VPIL6C. The chitosan nanoparticles (CNP) were prepared by ionic cross linkage to entrap the VPIL6C (VPIL6C-CNP), VPIL6 (VPIL6-CNP) and CpG (CpG-CNP). 42-Day old female mice were divided into four groups and intramuscularly injected respectively with 6 pmol VPIL6C-CNP, VPIL6-CNP, CpG-CNP and VR1020-CNP along with the bivalent vaccines against the Pasteurellosis and hog cholera. The blood was weekly collected from mice after vaccination to detect the changes of immunoglobulins, specific antibodies, IL-2, IL-4, IL-6 and immune cells. 28 days after vaccination, the mice were orally challenged with virulent Pasteurella multocida. The results showed that in comparison with those of the control VR1020 group, the content of immunoglobulins, specific antibodies and interleukins significantly increased in the sera from the treated two groups (P < 0.05). Meanwhile, the number of lymphocytes and monocytes also remarkably elevated in the treated groups (P < 0.05). The immune responses of VPIL6C mice were notably stronger than those of VPIL6 and CpG group. The challenge results proved that the overall immunity was further promoted in the treated mice which resisted the challenge infection; while the control mice manifested evident symptoms and lesions, and died of infection. These suggested that VPIL6C-CNP could better promote the immunity and resistance of mice against Pasteurellosis than VPIL6-CNP and CpG-CNP, and facilitate the development of effective adjuvant to enhance the immunity of animal against infection.

RésuméUn novel oligodeoxynuleotides qui contient 11 CpG motifs a été synthétisé et misse dans le VR1020 plasmide qui contient interleukin-6 (IL-6) gene (VPIL6) de couchon pour construire un recombinant plasmide, VPIL6C. Le chitosan nanoparticles (CNP) ont été preparé par ionic cross linkage pour capturer le VPIL6C (VPIL6C-CNP), CpG (CpG-CNP) et VPIL6 (VPIL6-CNP). Les souris femelle de 42 jours ont été divisées en trois groupes et intramuscularly a été injecté respectivement avec 6 pmol VPIL6C-CNP, VPIL6-CNP, CpG-CNP et VR1020-CNP avec le bivalent vaccines contre le Pasteurellosis et hog cholera.Le sang a été ramassé chaque semaine des souris après le vaccination pour détecter des changements de immunoglobulines, antibois spécifique, IL-2, IL-4, IL-6 et cellules immunisés. 28 jours après le vaccination, les souris ont été provoqué oralement avec le virulent Pasteurella multocida. Les résultes démontre qu’en comparaison avec ceux du groupe de contrôle VR1020, le content de immunoglobulines, des antibois spécifique et interleukines augment significativement dans le sera des deux groupes traités (P < 0.05); en même temps, le nombre de lymphocytes et monocytes ont aussi augmenté dans les groupes traités (P < 0.05). The responses de immunité de VPIL6C des souris ont été plus fortes que celles des groupes VPIL6 et CpG. Les résultes de la provocation prouve que l’immunité générale a été promouvez dans les souris traité qui résiste infection; tandis que les souris de contrôle manifestent les symptômes et meurt d’infection. Cela démontre que VPIL6C-CNP peut mieux promouver l’immunité et la résistance des souris contre Pasteurellosis que VPIL6-CNP, et facilite le développement d’adjuvant effective pour augmenter l’immunité des animaux contre infection.