Evaluation of highly sensitive indigenous milk ELISA kit with fecal culture, milk culture and fecal-PCR for the diagnosis of bovine Johne's disease (BJD) in India

Country lacks indigenous diagnostic kits against Johne's disease in animals. Indigenous ELISA and IS 900 PCR kits, originally developed for goats and sheep, have been adapted for screening of lactating cows. Multiple diagnostic tests were used to screen 26 lactating dairy cows against Johne's disease. Milk ELISA was evaluated with fecal culture, milk culture and fecal PCR. Of the 26 samples from lactating cows, 84.6, 96.1, 88.4 and 23.0% were positive in fecal culture, milk culture, m-ELISA and m-PCR, respectively. Comparatively milk sediment and milk fat culture detected 84.6 and 76.9% cows positive, respectively. Comparatively fecal culture and milk culture detected 84.6 and 96.1% cows positive, respectively. M-ELISA detected 11.5, 0.0, 11.5, 61.0 and 15.3%, cows as negative, suspected, low positive, positive and strong positive, respectively. There was good correlation between milk and fecal culture with m-ELISA. Three negative cows in m-ELISA were also detected in milk and fecal culture. Of the 26 decontaminated fecal samples, 23.0% cows were positive using specific IS 900 f-PCR. Comparative evaluation of m-ELISA with fecal and milk culture showed agreement in 80.7 and 84.6% cows, respectively. Sensitivity of m-ELISA with respect to fecal and culture was 90.9 and 95.6%, respectively. Comparative evaluation of four tests (milk culture, fecal culture, m-ELISA and f-PCR) showed that only 15.3% cows were detected in all the four tests. In three tests (fecal and milk culture and m-ELISA), 57.6% cows were detected positive. None of the cow was exclusively detected in f-PCR. Of the four diagnostic tests used milk culture was most sensitive (96.15%), followed by fecal culture (86.6%), m-ELISA (76.9%) and IS 900 PCR (23.0%) for the diagnosis of bovine Johne's disease (BJD). Milk ELISA detected only one cow extra, which was negative in milk culture. In view of the simplicity, rapidity and efficacy present milk ELISA kit employing soluble protoplasmic antigen from native Map ‘Bison type’ genotype of goat origin can be reliable for screening of bovine population against Johne's disease in India.

RésuméLe pays manque des kits diagnostiques indigènes contre la maladie de Johne dans les animaux. Indigène ELISA et EST 900 kits PCR, à l’origine développés pour les chèvres et les moutons, ont été adapté pour projection de vaches produisant du lait. Les épreuves diagnostiques multiples ont été utilisées à l’écran 26 produisant du lait la crémerie vaches contre la maladie de Johne. Le Lait ELISA a été évalué avec la culture fécale, la culture de lait et PCR fécal. Des 26 échantillons des vaches produisant du lait, 84.6, 96.1, 88.4 et de 23.0% étaient positif dans la culture fécale, la culture de lait, le m-ELISA et le m-PCR, respectivement. Relativement lait le sédiment et la culture de gras de lait ont découvert des vaches de 84.6% et de 76.9% positives, respectivement. La culture relativement fécale et la culture de lait ont découvert des vaches de 84.6% et de 96.1% positives, respectivement. Le m-ELISA a découvert 11.5, 0.0, 11.5, 61.0 et 15.3%, les vaches comme négatif, soupçonné, bas positif, positif et fort positif, respectivement. Il y avait la bonne correlation entre le lait et la culture fécale avec le m-ELISA. Trois vaches négatives dans le m-ELISA étaient aussi découvert dans le lait et la culture fécale. Des 26 échantillons fécaux décontaminés, les vaches de 23.0% étaient l’utilisation positive spécifique EST 900 f-PCR. L’évaluation comparative de m-ELISA avec fécal et de lait la culture a montré l’accord dans les vaches de 80.7 et de 84.6%, respectivement. Sensibilité de m-ELISA en ce qui concerne fécal et la culture était 90.9 et 95.6%, respectivement. Évaluation comparative de quatre épreuves (la culture de lait, la culture fécale, le m-ELISA et f-PCR) y a montré des vaches seulement de 15.3% ont été découverts dans toutes les quatre épreuves. Dans trois épreuves (fécal et culture de lait et m-ELISA), 57.6% les vaches ont été découvertes positives. Aucune de la vache n’a été exclusivement découverte dans f-PCR. Des quatre les épreuves diagnostiques ont utilisé, la culture de lait était la plus sensible (96.15%), suivis par la culture fécale (86.6%), le m-ELISA (76.9%) et SONT 900 PCR (23.0%) pour la diagnose de Johne bovin maladie (BJD). ELISA de Lait a découvert seulement une vache supplémentaire, qui était négatif dans la culture de lait. En vue de la simplicité, la rapidité et l’effet présentent du lait le kit d’ELISA employant soluble l’antigène de protoplasmic de la Carte natale ‘génotype’ de type de Bison d’origine de chèvre peut être sûr pour la projection de population bovine contre la maladie de Johne en Inde.