Innate immune activation of swine intestinal epithelial cell lines (IPEC-J2 and IPI-2I) in response to LPS from Salmonella typhimurium

The innate immune system has the basic function of identifying and eradicating microbial invaders and alerting the adaptative immune system to their presence. In this study, the porcine intestinal innate immune response was evaluated by analysing the expression of TLRs, cytokines and chemokines in two porcine epithelial cell lines from different regions: IPEC-J2 (jejunum) and IPI-2I (ileum). Both cells lines were stimulated with 1 μg of LPS from Salmonella typhimurium. RNA was collected at 30 min, 1, 2, 3 and 4 h after treatment. Expression of TLR-1, -2, -3, -4, -6, -8, -9, -10, TNF-α, IL-1β, -8 and MCP-1 was quantified relative to the quantity of Cyclophilin-A mRNA using real-time quantitative PCR (RTQ-PCR). The results obtained show up differences in the gene expression between both cell lines IPEC-J2 and IPI-2I as response to LPS from S. typhimurium during the activation time, which may suggest an in vivo variability in the innate immune response against pathogens in different regions of the host's gut.

RésuméLa fonction essentielle du système immunitaire innée est d’identifier et d’éliminer les envahisseurs microbiens et d’alerter le système immunitaire adapté à leur présence. Dans cette étude, la réponse immunitaire innée de l’intestin de porc a été évaluée par l’analyse de l’expression des TLRs, cytokines et des chémokines dans deux lignées de cellules épithéliales porcines provenant de différentes régions: IPEC-J2 (jéjunum) et de IPI-2I (iléon). Les deux lignées cellulaires ont été stimulées avec 1 μg LPS de Salmonella typhimurium et les ARN extraits à 30 min, 1, 2, 3 et 4 heures après le traitement. L’expression de TLR-1, -2, -3, -4, -6, -8, -9, -10, TNF-α, IL-8, -1β et MCP-1 ont été quantifiés par rapport à la quantité de l’ARNm de la Cyclophilin-A par PCR quantitative en temps réel (RTQ-PCR). Les résultats obtenus montrent des différences dans l’expression des gènes entre les deux lignées de cellules IPEC-J2 et IPI-2I en réponse au LPS de S. typhimurium pendant le temps d’activation, ce qui peut suggérer une variabilité de la réponse immunitaire innée in vivo contre les pathogènes dans les différentes régions de l’intestin de l’hôte.