کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
7792954 | 1500657 | 2014 | 6 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Cloning and expression of the cold-adapted endo-1,4-β-glucanase gene from Eisenia fetida
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
CMCCBBdNTPCoomassie Brilliant Blue - Coomassie درخشان آبیCold-adapted enzyme - آنزیم انعطاف پذیر سردEisenia fetida - آیزینیا فوتیداExpression - اصطلاحsodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدendo-1,4-β-glucanase - اندو-1،4-β-گلوکانازCloning - تاگسازی یا شبیه سازیdeoxynucleotide triphosphate - دگزینوکوتیید تری فسفاتCarboxymethyl cellulose - کربوکسی متیل سلولزglycoside hydrolase - گلیکوزید هیدرولاز
موضوعات مرتبط
مهندسی و علوم پایه
شیمی
شیمی آلی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Biofuel production from plant-derived lignocellulosic material using fungal cellulases is facing cost-effective challenges related to high temperature requirements. The present study identified a cold-adapted cellulase named endo-1,4-β-glucanase (EF-EG2) from the earthworm Eisenia fetida. The gene was cloned in the cold-shock expression vector (pCold I) and functionally expressed in Escherichia coli ArcticExpress RT (DE3). The gene consists of 1368 bp encoding 456 amino acid residues. The amino acid sequence shares sequence homology with the endo-1,4-β-glucanases of Eisenia andrei (98%), Pheretima hilgendorfi (79%), Perineresis brevicirris (63%), and Strongylocentrotus nudus (58%), which all belong to glycoside hydrolase family 9. Purified recombinant EF-EG2 hydrolyzed soluble cellulose (carboxymethyl cellulose), but not insoluble (powdered cellulose) or crystalline (Avicel) cellulose substrates. Thin-layer chromatography analysis of the reaction products from 1,4-β-linked oligosaccharides of various lengths revealed a cleavage mechanism consistent with endoglucanases (not exoglucanases). The enzyme exhibited significant activity at 10 °C (38% of the activity at optimal 40 °C) and was stable at pH 5.0-9.0, with an optimum pH of 5.5. This new cold-adapted cellulase could potentially improve the cost effectiveness of biofuel production.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Carbohydrate Polymers - Volume 101, 30 January 2014, Pages 511-516
Journal: Carbohydrate Polymers - Volume 101, 30 January 2014, Pages 511-516
نویسندگان
Mitsuhiro Ueda, Akihiro Ito, Masami Nakazawa, Kazutaka Miyatake, Minoru Sakaguchi, Kuniyo Inouye,