Intérêt de la biologie moléculaire dans le diagnostic rapide de la trisomie 21 et des aneuploïdies les plus fréquentes

RésuméObjectifLes aneuploïdies des chromosomes 13, 18, 21, X et Y sont les anomalies chromosomiques les plus fréquemment rencontrées chez l’Homme et sont à l’origine de syndromes malformatifs associés à un retard mental justifiant qu’une démarche de dépistage soit proposée. Pendant la grossesse, leur dépistage repose principalement sur la mesure de la clarté nucale du fœtus et le dosage de marqueurs sériques maternels. Ce dépistage génère un nombre élevé de prélèvements fœtaux pour étude du caryotype, technique longue et coûteuse demandant deux à trois semaines pour le rendu du résultat. Notre étude porte sur le diagnostic rapide de ces aneuploïdies par biologie moléculaire. Deux techniques ont été utilisées : le kit MLPA (MRC Holland) qui détecte les aneuploïdies 13, 18, 21, X et Y en amplifiant des sondes spécifiques de ces chromosomes, et des PCR multiplexes fluorescentes spécifiques de régions microsatellites.Patientes et méthodesNous avons testé la capacité de ces deux méthodes moléculaires à détecter ces anomalies chromosomiques sur 400 liquides amniotiques ou villosités choriales, prélevés chez des femmes enceintes présentant un risque élevé d’aneuploïdies.RésultatsNous avons mis en évidence quatre trisomies 21, une trisomie 13, une monosomie 13, une trisomie 18, deux triploïdies, une trisomie X ainsi qu’un syndrome de Klinefelter.Discussion et conclusionDans notre étude, 100 % des principales aneuploïdies ont été diagnostiquées en 48 heures par biologie moléculaire, sans résultat faussement négatif ou positif, ce qui devrait faire de cette méthode une technique de choix dans le diagnostic rapide de ces anomalies en complément du caryotype par culture cellulaire qui reste indispensable à un résultat chromosomique complet.

ObjectiveTrisomy of chromosome 13, 18, 21 and sex chromosome aneuploidies are the most common chromosomal abnormalities encountered in prenatal screening and are responsible for polymaformative syndrome associated with severe mental retardation. This high degree of morbidity justifies the prenatal diagnosis of these aneuploidies. Fetal nuchal translucency measurement and maternal serum biochemical marker assessment are the method of choice used for antenatal screening of aneuploidies. This prenatal screening leads to numerous maternal samplings followed by karyotyping which is cost-effective, time consuming, while results are generally returned between 2 and 3 weeks. Our study describes the research of common aneuploidies by molecular biology. We have used on one hand the MLPA kit (MRC Holland) based on amplification of specific DNA probes that hybridize with chromosomes 13, 18, 21, X, Y. On the other hand we have developped multiplex fluorescent PCR, amplifying microsatellite DNA sequences.Patients and methodsWe have evaluated the efficiency of these two techniques to detect chromosomal abnormalities by screening 400 amniotic fluids or chorionic villi samples obtained from pregnant women presenting a high risk of chromosomal aneuploidy.ResultsWe have found four trisomies 21, one trisomy 13, one monosomy 13, one trisomy 18, two triploidies, one trisomy X and one Klinefelter syndrome.Discussion and conclusionIn our study we have detected by molecular biology, in less than 48 h, 100% of common chromosomal aneuploidies without false positive or false negative results which could lead molecular biology as a method of choice for the rapid detection of common aneuploidies in addition to fetal karyotyping.