کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
9127261 | 1569973 | 2005 | 9 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Molecular cloning and characterization of a cellulase gene from a symbiotic protist of the lower termite, Coptotermes formosanus
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
CMCGHFIPTGHCAcDNA - cDNADNA complementary to RNA - DNA مکمل RNASDS–PAGE - SDS-PAGEsodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدisopropyl β-D-thiogalactopyranoside - ایزوپروپیل β-D-thiogalactopyranosideHydrophobic cluster analysis - تجزیه خوشه HydrophobicCellulose degradation - تجزیه سلولزBase pair(s) - جفت پایه (ها)glycosyl hydrolase family - خانواده گلیکوزیل هیدرولازLuria–Bertani (medium) - لوریا بارتانی (متوسط)plaque-forming unit(s) - واحد پلاک سازی (ها)polymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازpfu - پفوcDNA library - کتابخانه cDNAcarboxymethylcellulose - کربوکسی متیل سلولزGlycosyl Hydrolase - گلیکوزیل هیدرولاز
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
ژنتیک
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
The endo-β-1,4-glucanase gene was cloned from a cDNA library constructed from the mixed population of symbiotic protists in the hindgut of the lower termite, Coptotermes formosanus, using the lambda ZAP II vector. The recombinant phage library was screened for cellulolytic activity by the Congo red staining procedure. The nucleotide sequence comprised 941 nucleotides including a polyA tail sequence and showed high sequence similarity with endoglucanase genes belonging to glycosyl hydrolase family 5. Determination of the 5â² end of the cellulase gene using the 5â²RACE method showed that the full-length cDNA comprised a 921-bp ORF, encoding a putative 33,620 Da protein. The organismal source of this cellulase gene was identified using PCR with gene-specific primers and whole-cell in situ hybridization as the smallest symbiotic hypermastigote protist, Spirotrichonympha leidyi. The optimal pH and temperature of the cellulase heterologously expressed in Escherichia coli were 5.8-6.0 and 70 °C, respectively. The Km and Vmax values on carboxymethyl cellulose (CMC) substrate were 1.90 mg/ml and 148.2 units/mg protein, respectively.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Gene - Volume 349, 11 April 2005, Pages 67-75
Journal: Gene - Volume 349, 11 April 2005, Pages 67-75
نویسندگان
Tetsushi Inoue, Shigeharu Moriya, Moriya Ohkuma, Toshiaki Kudo,