کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
10870794 | 1074020 | 2013 | 7 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
A western blot assay to measure cyclin dependent kinase activity in cells or in vitro without the use of radioisotopes
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
CPTCDK1HEPESCDK2IPTGDTTPBSEGTA4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid - 4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic acidDMSO - DMSOisopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside - ایزوپروپیل β-D-1-thiogalactopyranosidedithiothreitol - دیتیوتریتولDimethyl sulfoxide - دیمتیل سولفواکسیدPhosphate-buffered saline - محلول نمک فسفات با خاصیت بافریMitosis - میتوزcamptothecin - کامپتوتسین Tissue culture - کشت بافتcyclin dependent kinase 1 - کیناز وابسته به سیکلین 1cyclin dependent kinase 2 - کییناز وابسته به کیناز 2
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
علوم کشاورزی و بیولوژیک
دانش گیاه شناسی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
We developed a quantitative method to measure the activity of cyclin-dependent kinases (Cdks) by western blotting, without radioisotopes. We prepared a recombinant protein substrate based upon the natural Cdk1 substrate, PP1Cα. By combining this substrate in a western blot method using fluorochrome based antibodies and phospho-imager analysis, we measured the Km of ATP binding to Cdk1 to be 3.5 μM. We then measured Cdk1 activity in cell extracts from interphase or mitotic cells, and demonstrated that previously identified Cdk inhibitors could be detected by this assay. Our data show that we have a safe, reliable assay to identify Cdk1 inhibitors and measure Cdk1 activity.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: FEBS Letters - Volume 587, Issue 18, 17 September 2013, Pages 3089-3095
Journal: FEBS Letters - Volume 587, Issue 18, 17 September 2013, Pages 3089-3095
نویسندگان
Cody W. Lewis, Ryan G. Taylor, Philip M. Kubara, Kris Marshall, Laurent Meijer, Roy M. Golsteyn,