Use of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) to generate transgenic animals

Even though intracytoplasmic sperm injection (ICSI) has been widely used for the production of offspring in human infertility clinics and in reproductive research laboratories using mice, many researchers engaged in animal transgenesis still consider it somewhat cumbersome. The greatest advantage of ICSI-mediated transgenesis is that it allows introduction of very large DNA transgenes (e.g., yeast artificial chromosomes), with relatively high efficiency into the genomes of hosts, as compared to pronuclear injection.Recently, we have developed an active form of intracytoplasmic sperm injection-mediated transgenesis (ICSI-Tr) with fresh sperm utilizing transposons. The transgenic efficiencies rival all transgenic techniques except that of lentiviral methods.

RésuméBien que l’ICSI (intracytoplasmic sperm injection) a été largement utilisée en clinique comme méthode de reproduction médicalement assistée dans le cas de stérilité humaine et dans les laboratoires pour des recherches sur la reproduction, beaucoup de chercheurs restent persuadés que cette technique est lourde. Le principal avantage de l’ICSI pour obtenir des animaux transgéniques est que l’on peut utiliser des longs fragments d’ADN (comme par exemple des chromosomes artificiels) avec une efficacité relativement bonne en comparaison avec l’injection dans les pronuclei.Récemment, nous avons développé une variante active de la méthode, ICSI-Tr, basée sur l’utilisation de sperme frais et de transposons. Cette méthode rivalise avantageusement avec mes autres techniques de transgenèse, sauf avec celle utilisant les vecteurs lentiviraux.