Comparative nitric oxide production by LPS-stimulated monocyte-derived macrophages from Ovis canadensis and Ovis aries

Bighorn sheep are more susceptible to respiratory infection by Mannheimia haemolytica than are domestic sheep. In response to bacterial challenge, macrophages produce a number of molecules that play key roles in the inflammatory response, including highly reactive nitrogen intermediates such as nitric oxide (NO). Supernatants from monocyte-derived macrophages cultured with M. haemolytica LPS were assayed for nitric oxide activity via measurement of the NO metabolite, nitrite. In response to LPS stimulation, bighorn sheep macrophages secreted significantly higher levels of NO compared to levels for non-stimulated macrophages. In contrast, levels of NO produced by domestic sheep macrophages in response to M. haemolytica LPS did not differ from levels detected in non-stimulated cell cultures. Nitrite levels detected in supernatants of LPS-stimulated bighorn macrophage cultures treated with an inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitor, NG-monomethyl-l-arginine, were similar to that observed in non-stimulated cultures indicating a role for the iNOS pathway.

RésuméLes moutons ‘Bighorn’ (Ovis canadensis) sont plus sensibles à l'infection respiratoire par Mannheimia haemolytica que les moutons domestiques. En présence de cette bactérie, les macrophages produisent un certain nombre de molécules qui jouent des rôles important dans la réponse inflammatoire, y compris les intermédiaires de pazote hautement tels que l'oxyde nitrique (NO). Les surnageants des macrophages ont été cultivés en présence de lipopolisaccharide de M. haemolytica pour mesurer la présence de poxyde nitrique. En réponse à la stimulation de lipopolisaccharide, les macrophages de moutons ‘Bighorn’ ont sécrété des niveaux d'oxyde nitrique sensiblement plus élevés que ceux obtenus à partir des macrophages non-stimulés. En revanche, les niveaux d'oxyde nitrique produits par des macrophages de moutons domestiques en réponse aux lipopolisaccharide de M. haemolytica n'ont pas différé par rapport aux niveaux détectés dans les cultures de cellules non-stimulées. Les niveaux de nitrite détectés dans les surnageants de culture de macrophage de ‘Bighorn’ stimulés par les lipopolisaccharide et traités avec un inhibiteur induisant la synthase d'oxyde nitrique, NG-monométhyle-l-arginine, étaient semblables à ceux observés dans les cultures non-stimulées.