Intérêt d’un nouveau protocole de cytomètrie en flux appliqué au diagnostic et à la prévention des accidents peranesthésiques aux curares

RésuméBut de l’étudeNous évaluons ici une technique utilisant deux marqueurs d’activation (CD63 et IgE) et une expression des résultats en index d’activation (IA) calculé par un algorithme dédié.Matériel et méthodesVingt-six patients allergiques et 23 témoins ayant reçu des curares ont été sélectionnés (histoire clinique, tests cutanés et/ou IgE spécifiques). Les curares ont été testés soit en mélange (n = 26), soit séparément en utilisant, soit les allergènes natifs (n = 30), soit les allergènes commercialisés pour cytomètrie (n = 9). Les concentrations utilisées sont celles recommandées par la SFAR pour les IDR. Le protocole cytomètrique utilisé est le protocole IgE/CD63, les résultats étant exprimés en pourcentage de CD63 et en index d’activation (IA), calculé par un algorithme spécifique incluant les moyennes d’intensité de fluorescence (MIF) des populations IgE++ et CD63+ et −.RésultatsLes curares testés ne montrent pas de toxicité pour les basophiles, y compris à des concentrations dix fois supérieures aux concentrations diagnostiques. Avec les allergènes natifs les sensibilités respectives pour le marqueur CD63 seul ou pour l’IA sont de 68 et 100 % pour les mélanges, 67 et 100 % pour les curares spécifiques. Avec les allergènes commerciaux, la sensibilité pour les curares spécifiques est de 47 et 100 %. La spécificité est de 100 % pour le CD63 seul et de 98 % pour l’IA. La liaison avec les tests cutanés (Khi2 calculé pour la population des allergiques) est significative pour les deux marqueurs et pour les deux types d’allergènes. Enfin, la corrélation index/IgE spécifique n’est pas significative.ConclusionCe nouveau protocole cytomètrique permet d’envisager une utilisation plus large de cette méthode en allergoanesthésie.

Aim of the studyWe tested here a new cytometric method based on the use of two activation markers (CD63 and IgE) and result's expression in activation index (AI).Material and methodsTwenty-six allergic patients and 23 controls having received a neuromuscular blocker (NMB) have been selected on the basis of clinical history, skin tests and specific IgEs. NMB were tested mixed (n = 26) or alone (injectable form, (n = 30) and allergens commercialized for flow cytometry (n = 9)). Concentrations used were the same than for IDR according to the recommandations of the French Society of Anaesthesia and Resuscitation (SFAR). The cytometric protocol used was the IgE/CD63 protocol, results being expressed in percentage CD63 and in AI calculated by a specific algorithm involving the mean fluorescence intensity (MFI) of the IgE+ and the CD63+ and − populations.ResultsIn the technical described here NMB exhibited no toxicity even for concentretions 10 times higher than concentrations used for diagnosis. With the injectable form, the respective sensitivities observed for CD63 alone and the AI were 68 and 100% for the mixture of NMB and, 67 and 100% for the isolated NMB. With the NMB commercialized for flow cytometry, sensitivities were 47 and 100%. Specificities were 100% for CD63 alone and 98% for the AI. The link (Chi2) between skin tests and flow cytometry was significant for the two markers and the two allergen types. Correlation between AI and specific IgEs was not significant.ConclusionThe new flow cytometric protocol described here has the necessary characteristics of a biological test which could be included in the pre-anaesthetic check up.