Méthylation du spermatozoïde en Assistance médicale à la procréation (AMP)

RésuméDurant ces dernières années, de nombreux tests ont été développés pour étudier les propriétés fécondantes des spermatozoïdes. Cependant aucun d'entre eux n'est suffisant pour obtenir un facteur pronostique. En effet, l'intégrité de l'ADN spermatique est également nécessaire à une fécondation réussie donnant lieu à une grossesse. Elle peut être évaluée par la mesure du niveau de méthylation de l'ADN. En effet, chez les mammifères, la méthylation de l'ADN est impliquée dans de nombreux processus, entre autres, la régulation de l'expression du génome durant le développement embryonnaire. Le but de cette étude est d'évaluer l'impact du niveau de méthylation de l'ADN spermatique dans le succès des fécondations in vitro (FIV), en terme de taux de fécondation, de qualité des embryons et de taux de grossesse. L'immunomarquage de la 5-méthylecytosine, puis la quantification par analyse d'images ou en cytométrie en flux, a permis une évaluation objective du niveau de méthylation globale de l'ADN. Nos données montrent que le niveau de méthylation de l'ADN spermatique n'influence ni le taux de fécondation ni la qualité des embryons. En revanche, le taux de grossesse est altéré, si le niveau global de méthylation de l'ADN est inférieur à une valeur seuil. Le niveau de méthylation de l'ADN spermatique représente donc un nouveau paramètre de maturation spermatique.

In the last few years, many tests were developed to study the fertilizing properties of the spermatozoa. However none of them was useful to obtain a prognostic factor. Indeed, the integrity of the spermatic DNA is also necessary to a successful fertilization for obtaining a pregnancy. DNA integrity could be evaluated by the measurement of the level of DNA methylation. Indeed, in the mammals, the methylation of the ADN is involved in diverse processes amongst them the regulation of the genome expression during the embryonic development. The objective of this study is to evaluate the impact of the level of methylation of the spermatic DNA in the success of in vitro fertilization (IVF), in terms of rate of fertilization, quality of the embryos and rate of pregnancy. The immunostaining of the 5-methylecytosine, then the quantification by image analysis or with flow cytometry, allowed an objective evaluation of the level of total methylation of spermatic DNA. Our data show that the level of DNA methylation influences neither the fertilization rate nor the embryos quality. On the other hand, the rate of pregnancy is decreased if the total level of DNA methylation is lower than a threshold value. The level of spermatic DNA methylation represents a new parameter of spermatic maturation.