Mosaico del cromosoma X en diferentes tejidos de pacientes con falla ovárica prematura

ResumenAntecedentesLa falla ovárica prematura (FOP) es el cese de la función ovárica acompañado por hipoestrogenismo y niveles de hormona foliculoestimulante (FSH) ≥40 UI/ml antes de los 40 años. Las alteraciones cromosómicas, principalmente las que involucran al cromosoma X, son la causa genética más común, con una prevalencia que llega a alcanzar el 15%. La existencia de mosaicismo del cromosoma X se asocia con la aparición de la enfermedad.ObjetivoDeterminar la existencia de mosaicismo en diferentes tejidos de pacientes con falla ovárica prematura y compararlo con un grupo control.Materiales y métodosDurante el período comprendido entre mayo y noviembre de 2014 se recolectaron muestras de mucosa oral, sangre periférica y orina de un total de 6 pacientes con diagnóstico de FOP y cariotipo normal y de 6 controles pareados por edad. Se realizó el análisis de 3,000 núcleos de cada paciente y su respectivo control, 1,000 por cada tejido analizado, y se obtuvo un total de 6,000 núcleos por cada pareja de caso y control para determinar la proporción de mosaicismo del cromosoma X mediante la técnica de hibridación fluorescente in situ (FISH).ResultadosEn el grupo de casos, el análisis mediante FISH de los núcleos en interfase de los tres tejidos analizados mostró una línea celular con monosomía X en el 0.94% (0.3-2%) y una línea celular con trisomía X en el 0.52% (0-3.4%) del total de 18,000 células analizadas; la mayor proporción de células con cariotipo 45,X se observó en el urotelio. En el grupo control se encontró una señal correspondiente a monosomía X en el 0.32% (0-0.7%) y otra correspondiente a trisomía X en el 0.4% (0-3.4%).DiscusiónSe encuentra una diferencia significativa (p <0.05) entre el porcentaje de mosaicismo correspondiente a monosomía del cromosoma X entre las pacientes y las controles; de igual manera existe diferencia significativa entre el porcentaje de mosaicismo encontrado en células uroteliales y el encontrado en células de sangre periférica y mucosa oral.ConclusiónLa existencia de mosaicismo de bajo grado puede ser la causa de falla ovárica prematura. Este estudio indica que es necesario más de un tipo de tejido para identificar el mosaicismo de bajo grado. Por ello, el estudio de células del urotelio puede incluirse dentro del abordaje diagnóstico de las pacientes con esta enfermedad.

BackgroundPremature ovarian failure (POF) is the cessation of ovarian function accompanied by oestrogen deficiency and follicle-stimulating hormone (FSH) levels ≥40 IU/ml before the age of 40. Chromosomal abnormalities, mainly involving the X chromosome, are the most common genetic cause, with a prevalence of up to 15%. The presence of X chromosome mosaicism is associated with the onset of the disease.ObjectiveTo determine the presence of mosaicism in different tissue samples from patients with POF compared to a control group.Materials and methodsSamples of oral mucosa, peripheral blood and urine were collected from 6 patients diagnosed with POF who presented a normal karyotype, as well as from 6 age-matched controls, between May and November 2014. We analysed 3,000 nuclei from each patient and their respective control (1,000 nuclei from each tissue), thus obtaining a total of 6,000 nuclei per pair of case and control subjects. These nuclei were used to determine the percentage of X chromosome mosaicism using the fluorescent in-situ hybridisation (FISH) technique.ResultsIn the study group, FISH analysis of interphase nuclei from the 3 tissues analysed showed a cell line with monosomy X in 0.94% (0.3-2%) and a cell line with trisomy X in 0.52% (0-3.4%) of the total 18,000 cells analysed. Cells with 45,X were more frequent in the urothelium. In the control group, FISH analysis showed a cell line corresponding to monosomy X in 0.32% (0-0.7%) and to trisomy X in 0.4% (0%-3.4%) of cases.DiscussionA statistically significant difference (p <0.05) between the percentages of mosaicism for X chromosome monosomy was found between patients and their matched controls. Likewise, there was a statistically significant difference between the percentage of mosaicism found in urothelial cells and in cells from peripheral blood and oral mucosa.ConclusionThe presence of low-grade mosaicism can be a cause of POF. This study indicates that more than 1 tissue type is necessary to identify low-grade mosaicism. The study of urothelial cells should be included in the diagnostic approach of patients with POF.