کد مقاله کد نشریه سال انتشار مقاله انگلیسی ترجمه فارسی نسخه تمام متن
5534495 1551171 2017 5 صفحه PDF 12 صفحه WORD دانلود رایگان
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Original research articleLabel-free monitoring of DNA polymerase activity based on a thrombin-binding aptamer G-quadruplex
ترجمه فارسی عنوان
بررسی بدون نشان گذاری فعالیت DNA پلی مراز بر اساس ترومبین باند شونده با آپتامر G- کوادراپِلِکس1
کلمات کلیدی
DNA پلیمراز، بدون نشان گذاری، ترومبین باند شونده به آپتامر G- کوادراپِلِکس، تیوفلاوین T8
فهرست مطالب مقاله
چکیده

کلمات کلیدی

1.مقدمه

2. مواد و روش ها 

2.1 معرف ها و مواد 

2.2 اندازه گیری میزان نور فلورسانت 

2.3 بررسی فعالیت DNA پلی مراز در لحظه 

2.4 بهینه سازی شرایط آنالیز 

2.5 ارزیابی فعالیت DNA پلی مراز 

2.6 تاثیر مهار کنندگان بر فعالیت DNA پلی مراز 

3. نتایج و بحث 

3.1 پایه و اساس استراتژی 

3.2 بررسی فعالیت DNA پلی مراز در لحظه 

3.3 بهینه سازی شرایط آزمایشات 

3.4 کمیت فعالیت DNA پلی مراز 

3.5 تاثیر مهار کنندگان بر فعالیت DNA پلی مراز 

4.نتیجه گیری

اشکال و جداول
ترجمه چکیده
آزمایشی طراحی کردیم که در آن فعالیت DNA پلیمراز بر اساس ترومبین باند شده به آپتامر(TBA)9 G- کوادراپِلِکس تشخیص داده می شد. در حضور DNA پلیمراز، انتهای 3’-OH سوبسترای سنجاق سر برای جایگزینی TBA فوراً طویل شده، میتوان آن را سریعاً توسط رنگ ThT شناسایی کرد که این امر، منجر به افزایش نور فلورسانت میشود. این روش، بسیار حساس بوده و محدودیت شناسایی آن حدود 0.1 واحد/ میلی لیتر است. این روش ساده و مقرون به صرفه است و نیازی به نشان دار کردن با خاموش کننده های رنگ های فلوروسانت وجود ندارد. همچنین روش پیشنهاد شده را میتوان برای آنالیز مهار DNA پلیمراز استفاده کرد. به وضوح مشخص شد که روش پیشنهاد شده را میتوان برای غربالگری مهار کنندگان احتمالی DNA پلی مراز به کار بست.
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی بیولوژی سلول
چکیده انگلیسی


- A novel, real-time fluorescence assay has been developed for the detection of DNA polymerase activity.
- This method is highly sensitive with a detection limit of 0.1 U/mL.
- This method has been applied to detect DNA polymerase inhibitor.
- It is simple and cost-effective without requirement of labeling with a fluorophore-quencher pair.

We have developed a label-free assay for the detection of DNA polymerase activity based on a thrombin-binding aptamer (TBA) G-quadruplex. In the presence of DNA polymerase, the 3′-OH termini of the hairpin substrate are immediately elongated to replace the TBA, which can be recognized quickly by the ThT dye and results in an increase of fluorescence. This method is highly sensitive with a detection limit of 0.1 U/mL. It is simple and cost-effective without any requirement of labeling with a fluorophore-quencher pair. Furthermore, the proposed method can also be applied to analyze the inhibition of DNA polymerase, which clearly indicates that the proposed method can be applied for screening of potential DNA polymerase inhibitors.

ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Molecular and Cellular Probes - Volume 32, April 2017, Pages 13-17
نویسندگان
, , , , , ,