Expression and purification of recombinant swine interleukin-4

Un clone de cADN de l'interleukine-4 porcine (SwIL-4) a été obtenue par l'RT-PCR. Elle s'est exprimée sur E. coli avec le vecteur pQE30, sur les cellules pVL1392 d'insecte avec le vecteur vaculoviral AcNPV et sur les cellules mammaires avec le vecteur pCAGGS. Les protéines des SwIL-4 recombinées (rSwIL-4) se sont exprimées sur les cellules bactériennes ou d'insecte, et elles étaient purifiées utilisant unecolonne de chélate-affinité et d'immunoaffinité couplé avec l'anticorps monoclonal. La quantité et la bioactivité des produits ont été comparées. Toutes les cytokines recombinées ont réagi efficacement sur les anticorps spécifiques. Les poids moléculaires étaient environ 16 kDa chez l'rSwIL de E. coli, 15 et 18 kDa chez celle d'insecte et 15 et 20 chez celle mammaires. Les variations en poids des produits d'insecte et mammaires étaient probablement duesà des manières variées de glycosylation. Les protéines recombinées conservaient leur antigenicité et leur activité biologique d'induction de la prolifération de la cellule humaine TF-1. L'évaluation des effets de l'IL-4 porcine in vitro et in vivo est possible avec cette méthode de purification simple.