کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
9126919 | 1160188 | 2005 | 10 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Utilization of mammalian cells for efficient and reliable evaluation of specificity of antibodies to unravel the cellular function of mKIAA proteins
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
GSTPBSAPC2FITCDAPImRNATETkDaORFGFP4′,6-diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride - 4 '، 6-دیامیدینو-2-فنیلینول، دی هیدروکلرایدcDNA - cDNADNA complementary to RNA - DNA مکمل RNAmessenger RNA - RNA messengerSmall interfering RNA - RNA تداخل کوچکsiRNA - siRNABasic Local Alignment Search Tool - ابزار جستجوی محلی سازگاری محلیBlast - انفجارExpression vector - بردار بیانTetracycline - تتراسایکلینELISA - تست الیزاEnzyme-linked immunosorbent assay - تست الیزاBase pair(s) - جفت پایه (ها)Immunofluorescence staining - رنگ آمیزی ایمونوفلورسانسcytomegalovirus - سیتومگالوویروسCMV - سیتومگالوویروسfluorescein isothiocyanate - فلوئورسین ایسوتیوسیاناتopen reading frame - قاب خواندن بازPhosphate-buffered saline - محلول نمک فسفات با خاصیت بافریpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازMolecular weight - وزن مولکولیWestern blotting - وسترن بلاتینگgreen fluorescent protein - پروتئین فلورسنت سبزkilobase(s) - کیلو بایت (ها)kilodaltons - کیلودالتونglutathione-S-transferase - گلوتاتیون S-ترانسفراز
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
ژنتیک
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Complementary DNA (cDNA) clones for human KIAA genes have been isolated as long cDNAs (>Â 4 kb) with unknown functions. To facilitate the functional analysis of these human clones, we have isolated and determined the structures of their respective mouse homologues (mKIAA genes). Furthermore, we have comprehensively raised antibodies against the translated mKIAA proteins in order to establish a platform for their functional analysis. Since the specificity of these antibodies is critical for subsequent analyses of protein function, here we introduce two assays utilizing mammalian cells to improve their evaluation. First, we have established a semi-high-throughput production of C-terminally FLAG epitope-tagged proteins for Western blotting using specially designed mammalian expression vectors. Secondly, we have utilized immunofluorescence staining of mouse cells to analyze the subcellular localization of endogenous mKIAA proteins. Importantly, these methods allow us to detect potential posttranslational modification of the mKIAA/KIAA proteins and to predict their biological function based on their subcellular localization.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Gene - Volume 360, Issue 1, 24 October 2005, Pages 35-44
Journal: Gene - Volume 360, Issue 1, 24 October 2005, Pages 35-44
نویسندگان
Akiyuki Ozaki, Takahiro Nagase, Ayako Watanabe, Daisuke Nakajima, Kiyo Shimada, Mihoko Nagano, Osamu Ohara, Hisashi Koga, Susumu Inamoto,