Définition des erreurs maximales tolérées pour les grandeurs physiques ayant un effet significatif sur le résultat du groupage ABO-RH1 en technique microplaque

RésuméButLa vérification et le suivi métrologique des équipements sont en bonne voie de développement dans les laboratoires de l’établissement français du sang (EFS). Paradoxalement, les limites des paramètres physiques critiques susceptibles d’influencer les résultats sont rarement définies de façon objective, que ce soit par les fabricants ou les laboratoires. Cette étude a été initiée dans le but d’établir expérimentalement des erreurs maximales tolérées (EMT) pour les paramètres critiques, à savoir la température et le temps d’incubation, les volumes de distribution des réactifs et des échantillons, pour la méthode de groupage ABO-RH1 en microplaque. Tous les équipements utilisés étaient étalonnés et reliés au système international d’unité.Matériels et méthodesLes échantillons étaient les contrôles de qualité internes, utilisés dans le laboratoire. Trois points de consignes ont été définis pour chaque paramètre étudié : température d’incubation 18, 22 et 26 °C ; temps d’incubation 10, 15 et 20 min ; volume de sérums-tests et d’hématies échantillon 20, 30 et 40 μL ; volume d’hématies-tests 15, 20 et 25 μL ; volume de plasma échantillon 30, 40 et 50 μL.RésultatsToutes les combinaisons des différents points de consigne des valeurs métrologiques donnaient un résultat de groupage ABO-RH1 conforme à celui attendu. Aucun résultat indéterminé n’a été observé.ConclusionNotre plan expérimental permet de justifier de façon objective les EMT des principaux paramètres physiques susceptibles d’influencer le résultat du groupage ABO-RH1 en technique microplaque, et de les appliquer dans le cadre des vérifications métrologiques des équipements concernés. Notre étude démontre également la robustesse de cette méthode.

AimMetrological survey of analytic equipment is developing well in French blood bank laboratories, but still the limits of critical parameters affecting the result of basic methods are usually not defined. The aim of this study is to establish experimentally maximum permissible errors for critical physical values involved in microplate ABO-RH1 blood grouping, such as temperature and time of incubation and volumes of reagents and blood samples.Materials and methodsSamples were internal quality controls used routinely in the laboratory. Three set points were defined for each parameter: incubation temperature 18, 22 and 26 °C; incubation time 10, 15 and 20 min; reagent sera and sample cells volume 20, 30 and 40 μL; reagent cells volume 15, 20 et 25 μL; plasma sample volume 30, 40 et 50 μL. All equipments (temperature test chamber, chronometer and pipettors) were calibrated using national standards (COFRAC) according to appropriate methods for estimation of uncertainty of measurement. Significant components of uncertainty were taken into account to define a global uncertainty for each measurable quantity.ResultsAll tests results from any combination of the above set points (n = 81 for each sample tested in triplicate) were consistent with the expected result. Not one undetermined result was observed.ConclusionThe experimental design of this study allowed us to define accurately maximum permissible errors for major critical parameters involved in microplate ABO-RH1 blood grouping. Hence these values must be applied to metrological survey of the equipment. Further, our study demonstrates the robustness of the method.