Résistance aux quinolones de types qnr, aac (6′)-Ib-cr chez les entérobactéries isolées à Annaba en Algérie

RésuméBut de travailMontrer l’émergence des gènes qnr chez des entérobactéries résistantes à l’acide nalidixique isolées dans la ville d’Annaba en Algérie.Matériel et méthodesDes souches d’entérobactéries (n = 25) résistantes à l’acide nalidixique ont été isolées au laboratoire de microbiologie du centre hospitalier de la ville d’Annaba en Algérie. La résistance aux antibiotiques (méthode de diffusion et CMI) et la détection des bétalactamases à spectre étendu (BLSE) ont été réalisées selon les recommandations de la Société française de microbiologie. La caractérisation des gènes de résistance aux quinolones (qnrA, qnrB, qnrS, aac(6)-Ib-cr) et des BLSE (TEM, SHV, CTX-M1, CTX-M2, CTX-M8 et CTX-M9) est réalisée par PCR. La PCR multiplex est utilisée pour identifier les bétalactamases plasmidique de type AmpC. Tous les produits de PCR ont été séquencé dans les deux sens. Les expériences de conjugaison sont réalisées en utilisant la souche d’Escherichia coli K12J5 résistante à l’azide de sodium comme souche réceptrice.RésultatsParmi les 25 souches sélectionnées, 24 présentent une résistance à au moins quatre antibiotiques. Six souches présentent un phénotype de BLSE. Le gène qnr (variant B1) est retrouvé chez deux souches qui sont productrice de BLSE et qui hébergent au moins deux types de gènes betalactamases. Le gène aac (6′)-Ib est détecté chez trois souches dont une avec le variant aac(6′)-Ib-cr. Avec des primers spécifiques, nous avons montré que qnrB1, CTX-M-28, TEM1, aac(6′)-Ib-cr été cotransféré ensemble et que ces gènes sont portés par des plasmides conjugatifs de haut poids moléculaire.ConclusionL’émergence de combinaison de gènes de résistance pourrait poser un problème de santé publique. Ainsi, une politique de surveillance de la résistance paraît nécessaire.

Aim of the studyTo show the emergence of the qnr and aac (6′)-Ib-cr genes in nalidixic acid resistant enterobacteria isolated at Annaba city in Algeria.Materials and methodsEnterobacterial strains (n = 25) resistant to nalidixic acid have been isolated at the microbiology laboratory of the Annaba city hospital in Algeria Antibiotic susceptibility (disc diffusion method and MIC) and screening for Extended Spectrum Beta-Lactamase (ESBL) were performed according to the French Society for Microbiology guidelines. Characterization of quinolone resistance genes (qnrA, qnrB, qnrS, aac(6′)-Ib-cr) was investigated by PCR. Identification of ESBL (TEM, SHV, CTX-M1, CTX-M2, CTX-M8 and CTX-M9 groups) was performed by PCR. Identification of plasmid AmpC beta-lactamases was performed by multiplex PCR. All PCR products were sequenced on both strands. Conjugation experiments were performed using azide-resistant Escherichia coli K12J5 as a recipient strain.ResultsAmong the 25 strains selected, 24 were resistant to at least four antibiotics. Six strains showed an ESBL phenotype. The qnr gene (B1 type) was found in two ESBL producing strains with at least two types of bla gene. The aac (6′)-Ib gene was detected in three strains, one with the aac (6′) Ib-cr variant. With specific primers, we have shown that qnrB1, CTX-M-28, TEM1, aac (6′)-Ib-cr was cotransferred together and that these genes are carried by conjugative plasmids of high molecular weight.ConclusionThe emergence of combination of resistance genes may pose a public health problem. Thus, a policy of surveillance of resistance seems necessary.