کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8419748 | 1545744 | 2010 | 5 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
A simple two-step purification procedure for the iC3b binding collectin conglutinin
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
CL-43TBSTRIFMAHBSMBLhepes buffered saline - hepes بافر شورEDTA - اتیلن دی آمین تترا استیک اسید ethylenediamine tetra-acetic acid - اسید اتیل استاتین تترا استیکsodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدTris-buffered saline - تریس بافر شورTime-resolved immunofluorometric assay - تست ایمونوفلورومتریک مدت زمان حل شدهSPR - تشدید پلاسمون سطحیSurface plasmon resonance - تشدید پلاسمون سطحیcollectin-43 - جمع آوری 43Collectin - جمع آوری شدهComplement activation - فعال سازی مجددMannan-binding lectin - لکتین اتصال دهنده مانانC-type lectin - لکتین نوع CPurification - پاکسازیConglutinin - کنگلوتینین
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیوتکنولوژی یا زیستفناوری
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Bovine conglutinin is a serum protein involved in innate immunity. It binds calcium dependently to iC3b, a product of the complement component C3 deposited on cell surfaces, immune complexes or artificial surfaces after complement activation. We here present a simple and efficient two-step procedure for the purification of conglutinin. In the first step, bovine serum is incubated with non-coupled chromatographic TSK beads at 37 °C to allow complement activation and iC3b deposition on the beads and subsequent binding of conglutinin to iC3b. Conglutinin is then eluted from the beads by EDTA. In the second step, conglutinin is separated from iC3b and IgM by ion-exchange chromatography. This purification procedure yielded 81 μg of conglutinin per ml of serum with a recovery of 61.2%. Surface plasmon resonance analysis showed that the purified conglutinin had a high affinity for mannan (Kd = 2.3 â 3.2 nM). SDS-PAGE and time-resolved immunofluorometric assays showed that the conglutinin was not contaminated with other serum collectins such as collectin-43 or mannan-binding lectin.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 362, Issues 1â2, 31 October 2010, Pages 204-208
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 362, Issues 1â2, 31 October 2010, Pages 204-208
نویسندگان
Thomas Krogh-Meibom, Klaus Lønne Ingvartsen, Ida Tornoe, Nades Palaniyar, Anthony C. Willis, Uffe Holmskov,