کد مقاله کد نشریه سال انتشار مقاله انگلیسی نسخه تمام متن
8420589 1545899 2018 6 صفحه PDF دانلود رایگان
عنوان انگلیسی مقاله ISI
A temperature-sensitive replicon enables efficient gene inactivation in Pseudomonas aeruginosa
ترجمه فارسی عنوان
پرتویون حساس به دما، قادر به غیر فعال سازی ژن کارآمد در سودوموناس آئروژینوزا می باشد
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی بیوتکنولوژی یا زیست‌فناوری
چکیده انگلیسی
Tools to enable genome editing are essential for understanding physiology. Here we report a gene replacement method in Pseudomonas aeruginosa using a temperature-sensitive replicon plasmid that does not require mating or isolation of a merodiploid intermediate. This approach was validated by replacing the non-essential ampD gene with a gentamicin resistance cassette. In addition lpxA and lpxD, both located in a complex gene cluster including multiple downstream essential genes, were inactivated when complemented by each target gene in trans. These strains did not grow when expression of the gene in trans was repressed, confirming that both genes are essential for viability. This method facilitates efficient gene inactivation in P. aeruginosa.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Microbiological Methods - Volume 144, January 2018, Pages 47-52
نویسندگان
, ,