کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8479216 | 1551300 | 2014 | 12 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Conformational changes in dopamine transporter intracellular regions upon cocaine binding and dopamine translocation
ترجمه فارسی عنوان
تغییرات سازگار در مناطق داخل سلولی حمل کننده دوپامین پس از انتقال کوکائین و انتقال دوپامین
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
BCAnorepinephrine transporterNSSSMDGATintracellular loop 3FEPMTSDATHRPTCAVMDPVDFIL3MTSETMTSESMTSEASDS–PAGE - SDS-PAGEfree energy perturbation - اختلال انرژی آزادsodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدDopamine transporter - انتقال دهنده دوپامینDopamine transporter (DAT) - انتقال دهنده دوپامین (DAT)transmembrane segment - بخش غشاییbicinchoninic acid - بیسینکنینیک اسیدanalysis of variance - تحلیل واریانسANOVA - تحلیل واریانس Analysis of varianceDopamine transport - حمل و نقل دوپامینGABA transporter - حمل کننده GABANET - خالصtricyclic antidepressants - داروهای ضد افسردگی سه حلقه ایSASA - در حال حاضرCysteine accessibility - دسترسی سیستینDopamine - دوپامینMolecular dynamics - دینامیک ملکولی یا پویایی مولکولیSteered Molecular Dynamics - دینامیک مولکولی Steeredvisual molecular dynamics - دینامیک مولکولی بصریSubstituted cysteine accessibility method - روش دسترسی به سیتستین جایگزینSERT - سختserotonin transporter - سروتونین حمل کنندهSolvent accessible surface area - سطح قابل دسترس حلالMolecular dynamics simulations - شبیه سازی پویایی مولکولیMethanethiosulfonate - متانتیوسولفوناتHorseradish peroxidase - پراکسیداز هوررادیشPolyvinylidene fluoride - پلی وینیلیدین فلورایدSCAM - کلاهبرداریGABA - گاباgamma-amino butyric acid - گاما آمینو اسید بوتیریک
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیولوژی سلول
چکیده انگلیسی
The dopamine transporter (DAT), a member of the neurotransmitter:sodium symporter family, mediates the reuptake of dopamine at the synaptic cleft. DAT is the primary target for psychostimulants such as cocaine and amphetamine. We previously demonstrated that cocaine binding and dopamine transport alter the accessibility of Cys342 in the third intracellular loop (IL3). To study the conformational changes associated with the functional mechanism of the transporter, we made cysteine substitution mutants, one at a time, from Phe332 to Ser351 in IL3 of the background DAT construct, X7C, in which 7 endogenous cysteines were mutated. The accessibility of the 20 engineered cysteines to polar charged sulfhydryl reagents was studied in the absence and presence of cocaine or dopamine. Of the 11 positions that reacted with methanethiosulfonate ethyl ammonium, as evidenced by inhibition of ligand binding, 5 were protected against this inhibition by cocaine and dopamine (S333C, S334C, N336C, M342C and T349C), indicating that reagent accessibility is affected by conformational changes associated with inhibitor and substrate binding. In some of the cysteine mutants, transport activity is disrupted, but can be rescued by the presence of zinc, most likely because the distribution between inward- and outward-facing conformations is restored by zinc binding. The experimental data were interpreted in the context of molecular models of DAT in both the inward- and outward-facing conformations. Differences in the solvent accessible surface area for individual IL3 residues calculated for these states correlate well with the experimental accessibility data, and suggest that protection by ligand binding results from the stabilization of the outward-facing configuration. Changes in the residue interaction networks observed from the molecular dynamics simulations also revealed the critical roles of several positions during the conformational transitions. We conclude that the IL3 region of DAT undergoes significant conformational changes in transitions necessary for both cocaine binding and substrate transport.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Neurochemistry International - Volume 73, July 2014, Pages 4-15
Journal: Neurochemistry International - Volume 73, July 2014, Pages 4-15
نویسندگان
Yvette Dehnes, Jufang Shan, Thijs Beuming, Lei Shi, Harel Weinstein, Jonathan A. Javitch,