Development of an antigen microarray for high throughput monoclonal antibody selection

آنتیبادیهای مونوکلونال یک واکنش آزمایشگاهی ارزشمند هستند و به طور فزاینده ای برای درمان انواع بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرند. انتخاب جدیدترین آنتیبادیهای مونوکلونال که برای کار در برنامه های خاص معتبر هستند، علیرغم دسترسی به تکنیک های مختلف، می تواند منبع فشرده با نتایج نامشخص باشد. برای مقابله با این، ما یک رویکرد را ایجاد کرده ایم که قادر است غربالگری اولیه هیپرکروبیتامهای هیبریدوم تولید شده از یک حیوان را که ایمن سازی شده تا پنج آنتی ژن متفاوت باشد و سپس کلونینگ آنتیبادی را به یک پلاسمید تک بیان تبدیل کند. در حالی که این رویکرد تنگنای شبیه سازی سلولی را تسکین داد و توانایی مطلوب آن برای ترسیم عملکرد آنتی بادی قبل از کلونینگ را داشت، حجم کوچک سوپراسپرت هیبریدوما برای غربالگری محدودیت تعداد آنتی ژن ها را برای ایمن سازی جمع آوری کرد. در اینجا ما گزارش می دهیم که یک میکروآرایه آنتی ژن را تولید می کنیم که به طور قابل توجهی حجم سوپروانتانت مورد نیاز برای غربالگری عملکرد را کاهش می دهد. این روش می تواند تعداد قابل توجهی از آنتی ژن ها را برای انتخاب آنتی بادی مونوکلونال موازی از یک حیوان مجزا افزایش دهد. در نهایت، ما استفاده موفقیت آمیز از یک روش ترانسفکشن مناسب در مقیاس کوچک را برای سریع شناسایی پلاسمید ها که رمزگذاری آنتی بادی های کلون شده را نشان می دهند، نشان می دهیم، و در این رویکرد، تنگنای دیگری را نشان می دهد. به طور خلاصه، ما نشان می دهیم که یک روش ترکیبی از ترکیب فن آوری آنتی بادی هیبریدوم با روش غربالگری غربالگری و روش های کلونینگ آنتی بادی می تواند برای انتخاب آنتی بادی های منوکلونال خواص کاربردی مورد نظر در برابر بسیاری از آنتی ژن های مختلف از یک میزبان ایمنی شده مجزا استفاده شود.