کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
10826213 | 1064733 | 2005 | 9 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
N-terminal labeling of proteins using initiator tRNA
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شیمی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
![عکس صفحه اول مقاله: N-terminal labeling of proteins using initiator tRNA N-terminal labeling of proteins using initiator tRNA](/preview/png/10826213.png)
چکیده انگلیسی
Methodology based on tRNA mediated protein engineering is described for the introduction of fluorophores and other labels at the N-terminus of proteins produced in cell-free translation systems. One method for low-level (trace) N-terminal labeling is based on the use of an Escherichia coli initiator tRNAfMet misaminoacylated with methionine modified at the α-amino group. In addition to the normal formyl group, the protein translational machinery incorporates the fluorophore BODIPY-FL and the affinity tag biotin at an N-terminal end of the nascent protein. A second method for higher N-terminal labeling uses a chemically aminoacylated amber initiator suppressor tRNA and a DNA template which contains a complementary amber (UAG) codon instead of the normal initiation (AUG) codon. This more versatile approach is demonstrated using a variety of N-terminal markers including fluorescein, biotin, PC-biotin, and a novel dual marker conjugate (Biotin/BODIPY-FL).
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Methods - Volume 36, Issue 3, July 2005, Pages 252-260
Journal: Methods - Volume 36, Issue 3, July 2005, Pages 252-260
نویسندگان
Jerzy Olejnik, Sadanand Gite, Sergey Mamaev, Kenneth J. Rothschild,