The new mutation L321F in Candida albicans ERG11 gene may be associated with fluconazole resistance

BackgroundFor many years fluconazole has been commonly used to treat Candida infections. However, the indiscriminate use of this antimycotic therapy has favored the emergence of resistant isolates. Mutations in the ERG11 gene have been described as one of the primary mechanisms of resistance in Candida species.AimsIn this study we investigated missense mutations in ERG11 genes of Candida albicans, Candida glabrata and Candida tropicalis isolates previously evaluated by susceptibility testing to fluconazole.MethodsScreening for these mutations was performed on 19 Candida clinical isolates (eight C. albicans, five C. glabrata and six C. tropicalis) resistant and susceptible to fluconazole. The ERG11 gene was amplified by PCR with specific primers for each Candida species and analyzed by automated sequencing.ResultsWe identified 14 different missense mutations, five of which had not been described previously. Among them, a new mutation L321F was identified in a fluconazole resistant C. albicans isolate and it was analyzed by a theoretical three-dimensional structure of the ERG11p.ConclusionThe L321F mutation in C. albicans ERG11 gene may be associated with fluconazole resistance.

ResumenAntecedentesDurante años, el fluconazol se ha utilizado para tratar las infecciones por Candida. Sin embargo, el uso indiscriminado de este antimicótico ha favorecido la aparición de cepas resistentes. Se han descrito mutaciones en el gen ERG11 como uno de los principales mecanismos de resistencia en especies de Candida.Objetivos En el presente estudio se investigaron las mutaciones de sentido erróneo en genes ERG11 de aislamientos de Candida albicans, glabrata y tropicalis previamente examinados mediante pruebas de sensibilidad a fluconazol.MétodosLa detección de las mutaciones de este gen se realizó en 19 aislamientos clínicos de Candida (8 C. albicans, 5 C. glabrata y 6 C. tropicalis) sensibles y resistentes a fluconazol. El gen se amplificó mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con cebadores específicos para cada especie de Candida y se analizaron mediante secuenciación automatizada.ResultadosSe identificaron 14 mutaciones de sentido erróneo diferentes, 5 de las cuales no habían sido descritas previamente. Entre ellas, se identificó una nueva mutación L321F en un aislamiento de C. albicans resistente a fluconazol y que fue analizada mediante una estructura tridimensional teórica de ERG11p.ConclusiónLa mutación L321F del gen ERG11 de C. albicans puede asociarse a resistencia a fluconazol.