Analyse immunoprotéomique comparative des sécrétomes de souches de Staphylococcus aureus et S. epidermidis chez les patients souffrant d’infections sur prothèses articulaires

RésuméBut de l’étudeLes staphylocoques tels Staphylococcus aureus et S. epidermidis sont les germes les plus fréquemment retrouvés dans les infections sur prothèses articulaires (IPA), puisqu’ils représentent jusqu’à 75 % des bactéries isolées. Afin d’identifier des protéines antigéniques chez les deux espèces, nous avons étudié, par analyse immunoprotéomique, les sécrétomes d’une souche de S. aureus et d’une souche de S. epidermidis puis analysé la réponse humorale de patients souffrant d’IPA dirigée contre les protéines par tests Elisa.Patients et méthodesLes protéines sécrétées par la souche Mu50 (S. aureus) et la souche RP62A (S. epidermidis) ont été séparées par électrophorèse 2D puis analysées par western blot en utilisant des sérums de patients diagnostiqués positifs pour une IPA à S. aureus ou S. epidermidis. Les protéines antigéniques identifiées ont été exprimées sous forme recombinante puis analysées par tests Elisa en utilisant des panels de 32 sérums de patients et 96 sérums de donneurs de sang.RésultatsNous avons identifié 52 protéines sécrétées antigéniques chez les patients souffrant d’IPA : 42 chez la souche Mu50 et dix chez la souche RP62A. Vingt-deux protéines ont pu être identifiées comme spécifiques de l’espèce S. aureus. Parmi ces dernières, cinq sont fréquemment reconnues chez les patients souffrant d’IPA à S. aureus.ConclusionCette étude a montré que peu de protéines sécrétées sont antigéniques chez la souche RP62A si on compare à la souche Mu50. Les analyses nous ont permis d’identifier cinq protéines antigéniques et spécifiques de S. aureus qui pourraient contribuer au diagnostic, à la prévention ou au traitement de ces infections.

Aim of the studyStaphylocci such as Staphylococcus aureus and S. epidermidis are the most frequently pathogens associated to prosthesis joint infections (PJI), counting for 75% among the isolated bacteria. In this study, we identified PJI-related antigens using two-dimensional immunoblots of S. aureus and S. epidermidis exoproteins probed with serum samples from patients with confirmed PJIs. We further analysed by ELISA tests the response of patients to the identified proteins.Patients and methodsSecreted proteins from Mu50 strain (S. aureus) and RP62A strain (S. epidermidis) were separated by 2D gel electrophoresis and analyzed by western blot with serum samples from patients with confirmed S. aureus and S. epidermidis PJIs. Recombinant proteins corresponding to the identified proteins were expressed and screened with an in-house ELISA to evaluate their interest for the diagnosis of S. aureus and S. epidermidis PJIs.ResultsFifty-two antigenic exoproteins were identified: 42 belonging to Mu50 strain, and 10 to RP62A strain. Twenty-two proteins were identified as S. aureus specific. Among these proteins, five were most frequently recognized by patients with S. aureus PJI.ConclusionOur results showed that few exoproteins were antigenic by RP62A strain compared to Mu50 strain. We identified five antigenic and S. aureus specific proteins, which may contribute to diagnosis, prevention and treatment of these infections.