کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
5914977 | 1162766 | 2010 | 10 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
New baculovirus expression tools for recombinant protein complex production
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
AcNPVP10TFIIDSLICBEVSVLPSf21YFPProliferation arrestE. coliORFDNA - DNA یا اسید دزوکسی ریبونوکلئیکBAC - LACMOI - MESDS–PAGE - SDS-PAGEdeoxyribonucleic acid - اسید deoxyribonucleicEscherichia coli - اشریشیا کُلیsodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدSingle stranded - تک رشتهDouble stranded - دو رشتهVirus-like particle - ذره مانند ویروسRobotics - رباتیک structural biology - زیست شناسی ساختاریbaculovirus expression vector system - سیستم بردار بیان باکولو ویروسopen reading frame - قاب خواندن بازplaque forming units - واحدهای تشکیل پلاکpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازAutographa californica nuclear polyhedrosis virus - ویروس Polyhedrois هسته ای Autographa californicakilo bases - پایه های کیلوگرمیyellow fluorescent protein - پروتئین فلورسنت زردpfu - پفوpolh - پولشmultiplicity of infection - چندین عفونتbacterial artificial chromosome - کروموزوم مصنوعی باکتریایی
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شناسی مولکولی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Most eukaryotic proteins exist as large multicomponent assemblies with many subunits, which act in concert to catalyze specific cellular activities. Many of these molecular machines are only present in low amounts in their native hosts, which impede purification from source material. Unraveling their structure and function at high resolution will often depend on heterologous overproduction. Recombinant expression of multiprotein complexes for structural studies can entail considerable, sometimes inhibitory, investment in both labor and materials, in particular if altering and diversifying of the individual subunits are necessary for successful structure determination. Our laboratory has addressed this challenge by developing technologies that streamline the complex production and diversification process. Here, we review several of these developments for recombinant multiprotein complex production using the MultiBac baculovirus/insect cell expression system which we created. We also addressed parallelization and automation of gene assembly for multiprotein complex expression by developing robotic routines for multigene vector generation. In this contribution, we focus on several improvements of baculovirus expression system performance which we introduced: the modifications of the transfer plasmids, the methods for generation of composite multigene baculoviral DNA, and the simplified and standardized expression procedures which we delineated using our MultiBac system.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 172, Issue 1, October 2010, Pages 45-54
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 172, Issue 1, October 2010, Pages 45-54
نویسندگان
Simon Trowitzsch, Christoph Bieniossek, Yan Nie, Frederic Garzoni, Imre Berger,