کد مقاله کد نشریه سال انتشار مقاله انگلیسی نسخه تمام متن
10156937 1666436 2018 46 صفحه PDF دانلود رایگان
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Methods of reconstitution to investigate membrane protein function
ترجمه فارسی عنوان
روشهای بازسازی برای بررسی پروتئین غشاء
ترجمه چکیده
پروتئین های غشایی به طور جدی جداسازی شده اند. تمرکز این فصل گام اصلی پس از استخراج و پاکسازی پروتئین های غشایی است؛ یعنی بازسازی پروتئین بازسازی پروتئین ها را به دو لایه چربی تبدیل می کند که تا حدی شبیه محیط بومی آنها است. این محیط بومی برای ثبات پروتئین های غشایی حیاتی است، حصول اطمینان از انتقال تغییرات سازگاری حیاتی و حفظ تعامل مطلوب با بسترهای آن. بازسازی ممکن است فرم های متعددی داشته باشد و این ها به دو دسته گسترده طبقه بندی شده اند. سیستم های متقارن دسترسی بی دست و پا به هر دو طرف دو لایه را امکان پذیر می سازد. سیستم های حاوی محفظه شامل یک لومن هستند و برای اندازه گیری فرآیندهای حمل و نقل مناسب هستند. محقق تشویق می شود تا مشخص کند که چه جنبه های عملکرد پروتئینی انجام می شود و سیستم یا سیستم های بازسازی مطلوب را اعمال می کند. مهم است که توجه داشته باشیم که روند بازسازی، به پروتکل های تعریف نشده تعلق ندارد و نیاز به بهینه سازی تجربی برای اهداف خاص دارد.
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی زیست شیمی
چکیده انگلیسی
Membrane proteins are notoriously difficult to investigate in isolation. The focus of this chapter is the key step following extraction and purification of membrane proteins; namely reconstitution. The process of reconstitution re-inserts proteins into a lipid bilayer that partly resembles their native environment. This native environment is vital to the stability of membrane proteins, ensuring that they undergo vital conformational transitions and maintain optimal interaction with their substrates. Reconstitution may take many forms and these have been classified into two broad categories. Symmetric systems enable unfettered access to both sides of a bilayer. Compartment containing systems contain a lumen and are ideally suited to measurement of transport processes. The investigator is encouraged to ascertain what aspects of protein function will be undertaken and to apply the most advantageous reconstitution system or systems. It is important to note that the process of reconstitution is not subject to defined protocols and requires empirical optimisation to specific targets.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Methods - Volume 147, 1 September 2018, Pages 126-141
نویسندگان
, , ,