Studies on the activating capacity of heat killed M. tuberculosis and its culture filtrate proteins on polymorphonuclear neutrophils and peripheral mononuclear cells from tuberculosis patients

The efficacy of heat-killed Mycobacterium tuberculosis (HKMtb) and its culture filtrate proteins (CFP) to activate blood mononuclear cells (MC) and polymorphonuclear neutrophils (PMN) from tuberculosis patients was investigated. Respiratory burst, NO-derived metabolites, IL-2, IL-12 and TNF-α production of stimulated cells from 16 HIV- tuberculosis patients and 12 healthy controls were analyzed. Increased amounts of TNF-α in supernatants from baseline and stimulated polymorphonuclear and mononuclear cells of tuberculosis patients were detected when compared with controls, except for CFP stimulated neutrophils. Augmented IL-2 and IL-12 levels were observed in supernatants of both stimulated MC and PMN from TBP while no differences were found in control supernatants. The patients had a lower respiratory burst response than the controls, for both cell types, regardless of the stimulus employed. Higher nitrite concentrations were found in HKMtb- and CFP-stimulated mononuclear supernatants from patients, compared with controls.The obtained data of the stimulated cellular responses provides us information about the protective immunity against Mycobacterium tuberculosis and some resources to obtain a more efficient anti-tuberculous therapy.

ResumenEn este estudio se investigó la eficacia de M. tuberculosis muerto por calor (Mtbi) y las Proteínas del Filtrado del Cultivo (PFC) en la activación de las células mononucleares (MC) y polimorfonucleares neutrófilos (PMN) de sangre periférica de pacientes tuberculosos. Se evaluó en 16 pacientes tuberculosos, HIV- y 12 controles sanos el Estallido Respiratorio, los metabolitos derivados del NO y la producción de IL-2, IL-12 y TNF-α por las células estimuladas. Se detectó un incremento en la concentración de TNF- α en el sobrenadante de cultivo (s.c.) de PMN al comparar con los valores basales y en la evaluada en s.c. de MC y PMN estimulados, al ser comparadas con las del grupo control, excepto para los neutrófilos estimulados con PFC. Se mostraron niveles aumentados de IL-12 e IL-2 en s.c. de ambas células, MC y PMN estimuladas por en PTB, mientras que no se hallaron diferencias en los s.c. de los controles. Los valores basales de Estallido Respiratorio (RB) detectada en MC y PMN de pacientes no difirieron significantivamente de los correspondientes al grupo control. La expresión del Estallido Respiratorio en ambos tipos celulares fue menor en los pacientes que en los controles, independientemente del estímulo empleado. Se determinaron concentraciones de nitritos más elevadas en los sobrenadantes de las MC estimuladas con Mtbi y PFC provenientes de pacientes, comparadas con las de los controles. Los datos obtenidos relacionados al estímulo de la respuesta celular, nos proporcionan información sobre la inmunidad protectiva contra el M. tuberculosis y, a la vez, aportan algunos recursos útiles para una terapia anti-tuberculosa más eficiente.