کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
5913796 | 1162703 | 2016 | 39 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Easy mammalian expression and crystallography of maltose-binding protein-fused human proteins
ترجمه فارسی عنوان
بیان و کریستالوگرافی آسان پستانداران پروتئین انسانی پروتئین با ملتوز
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
PEIMMBPPNGase FSECMBPORFUMODENGPDBIMACHEKAKH - آهSize-exclusion chromatography - اندازه گیری کروماتوگرافی حذف شدهEndo H - اندو هendoglycosidase H - اندوگلیکوزیداز HCho - برایCrystallization - بلورسازیX-ray crystallography - بلورنگاری پرتو-ایکسTev - به توMammalian cell expression - بیان سلول پستاندارانChinese Hamster Ovary - تخمدان هامستر چینیuromodulin - توموگلوبینmolecular replacement - جایگزینی مولکولیopen reading frame - قاب خواندن بازAdipokinetic hormone - هورمون آدپیوکینتیکTobacco etch virus - ویروس تنباکو اچProtein Data Bank - پروتئین بانک اطلاعاتیmaltose-binding protein - پروتئین متصل به مالتوزPolyethylenimine - پلی اتیلنpeptide N-glycosidase F - پپتید N-گلیکوزیداز Fimmobilized metal affinity chromatography - کروماتوگرافی وابسته به فلز متمرکزhuman embryonic kidney - کلیه جنین انسانglycoproteins - گلیکوپروتئین ها
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شناسی مولکولی
چکیده انگلیسی
We present a strategy to obtain milligrams of highly post-translationally modified eukaryotic proteins, transiently expressed in mammalian cells as rigid or cleavable fusions with a mammalianized version of bacterial maltose-binding protein (mMBP). This variant was engineered to combine mutations that enhance MBP solubility and affinity purification, as well as provide crystal-packing interactions for increased crystallizability. Using this cell type-independent approach, we could increase the expression of secreted and intracellular human proteins up to 200-fold. By molecular replacement with MBP, we readily determined five novel high-resolution structures of rigid fusions of targets that otherwise defied crystallization.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 194, Issue 1, April 2016, Pages 1-7
Journal: Journal of Structural Biology - Volume 194, Issue 1, April 2016, Pages 1-7
نویسندگان
Marcel Bokhove, Hamed Sadat Al Hosseini, Takako Saito, Elisa Dioguardi, Katharina Gegenschatz-Schmid, Kaoru Nishimura, Isha Raj, Daniele de Sanctis, Ling Han, Luca Jovine,