La protéomique, une nouvelle technique pour un typage optimal des amyloses

RésuméLes amyloses forment un large spectre de maladies rares liées à la présence dans l'espace extracellulaire de dépôts protéiques insolubles de conformation bêta plissée présentant une biréfringence jaune-vert spécifique en lumière polarisée après coloration par le Rouge Congo. Une trentaine de protéines sont reconnues comme pouvant être responsables d'amylose. L'identification avec fiabilité de la protéine amyloïde est primordiale car elle conditionne le traitement. Le typage repose actuellement sur l'immunohistochimie et l'immunofluorescence sur coupes tissulaires. Les limites de cette approche sont nombreuses, ce qui se traduit par un typage non informatif dans 15 à 58 % des cas selon les études. Pour pallier ces difficultés, des méthodes de protéomique ont été développées afin de caractériser directement la protéine amyloïde. La technique la plus innovante réalisée à partir d'un bloc de tissu fixé et inclus en paraffine repose sur la microdissection laser suivie par une spectrométrie de masse en tandem. Elle permet de déterminer la nature de l'amylose dans plus de 95 % des cas. Cependant, l'expérience de cette technique est à ce jour très limitée en dehors de celle de la Mayo Clinic (Rochester, États-Unis). En France, une technique de protéomique très proche a été mise en place dans le service d'anatomie pathologique de l'hôpital Foch avec des résultats similaires. L'introduction de la protéomique en routine représente un progrès incontestable pour le typage des amyloses. Dans cet article, nous discutons les avantages et les limites des différentes techniques de typage et rapportons brièvement nos résultats de protéomique.

Amyloidosis is a rare group of diseases related to extracellular deposition of proteins in an insoluble beta-pleated sheet structure presenting a characteristic apple-green birefringence under polarized light after Congo red staining. Thirty types of proteins are known to cause amyloidosis. The accurate identification of the amyloid protein is of paramount importance since it is a key step for the clinical management and personalized treatment. Amyloid typing is usually based on immunohistochemistry and immunofluorescence on tissular sections. This approach has several limits leading to a subtyping failure rate of 15 to 58% of cases. To overcome these difficulties, proteomic methods have been developed to characterize directly the amyloid protein. The most advanced technique carried out on fixed and paraffin-embedded tissue consists of laser microdissection followed by mass spectrometry. The type of amyloidosis can be determined in more than 95% of cases. However, the experience for this technique is very limited apart from the Mayo Clinic (Rochester, United States). In France, a very close proteomic assay has been implemented in the department of pathology of Foch Hospital with similar results. The introduction of proteomics in clinical practice represents a major improvement for typing amyloidosis. In this article, we discuss the benefits and limits of the different techniques used for amyloid classification and we briefly report our proteomic results.