کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8359510 | 1542296 | 2018 | 6 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Optimization of Haemophilus influenzae adhesin transmembrane domain expression in Escherichia coli
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
PBS2-[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl] ethanesulfonic acidPMSFHRPIPTGHEPESisopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside - ایزوپروپیل β-D-1-thiogalactopyranosideBAM - بمRecombinant protein expression - بیان پروتئین نوترکیبOuter membrane - غشای خارجیinner membrane - غشای داخلیphenylmethylsulfonyl fluoride - فنیل متیل سولفونیل فلورایدβ-barrel assembly machinery - ماشین آلات مونتاژ β بشکهPhosphate-buffered saline - محلول نمک فسفات با خاصیت بافریHorseradish peroxidase - پراکسیداز هوررادیشOuter membrane protein - پروتئین غشای خارجیTrimeric autotransporter - گیربکس سهبعدی
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شیمی
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
To obtain a high yield of the transmembrane domain of Haemophilus influenzae adhesin (HiaTD) in Escherichia coli, we attempted to express the HiaTD with and without a signal sequence using a T7 expression system. The expression level of HiaTD after induction was followed by quantification of the purified HiaTD, flow cytometric analysis of the outer membrane integrated HiaTD, and immunoblotting assay of fractionated cell lysate. In the expression system with a signal sequence, although the amount of cell-surface-expressed HiaTD increased over time, the number of HiaTD-expressing cells decreased, probably because of plasmid instability. As a result, the amount of purified HiaTD reached a plateau at 2â¯h postinduction. Although expression without the signal sequence provides a large amount of proteins as inclusion bodies in some membrane proteins, HiaTD expressed without a signal sequence was not observed as inclusion bodies and seemed to be assembled into the outer membrane during or after cell lysis.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 145, May 2018, Pages 19-24
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 145, May 2018, Pages 19-24
نویسندگان
Eriko Aoki, Kazuo Fujiwara, Akio Shimizu, Sayaka Takase-Yoden, Masamichi Ikeguchi,