کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8360752 | 1542349 | 2013 | 6 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
On-column refolding of bone morphogenetic protein-2 using cation exchange resin
ترجمه فارسی عنوان
بازسازی پروتئین مورفوژنیک استخوان در ستون با استفاده از رزین مبادله کاتیونی
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
استخوان مورفوژنیک پروتئین-2، پروتئین دیمر، بازخوانی در ستون، کروماتوگرافی تبادل کاتیونی، بدن شامل،
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
زیست شیمی
چکیده انگلیسی
Refolding is often the bottle-neck step in producing recombinant proteins from inclusion bodies of Escherichia coli, especially for dimer proteins. The refolding process is protein specific, engaging a lot of time and cost to optimize conditions so that the thermodynamics favor protein refolding over competitive aggregation. Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) is a potent osteogenic agent having significant applications in bone regeneration therapy. In this study, we present a novel solid-phase refolding method for rapid and efficient refolding of recombinant BMP-2 dimer from E. coli. We employed a weak cation exchange resin as the adsorbing support, with decreasing gradient of denaturing agent and exposure to oxidizing conditions for adequate disulfide bond formation. Refolded BMP-2 was further purified using size exclusion chromatography and analyzed for its secondary structure and biological activity. The purified BMP-2 dimer showed dose-dependent induction of alkaline phosphatase (ALP) activity in MC3T3 pre-osteoblast cells, thus translating the success of our refolding method. This simple and rapid method can also be applied in refolding and purification of other BMP-2 like dimer proteins.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 90, Issue 2, August 2013, Pages 135-140
Journal: Protein Expression and Purification - Volume 90, Issue 2, August 2013, Pages 135-140
نویسندگان
Anuja M. Rane, Sriramakamal Jonnalagadda, Zhiyu Li,