کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8418080 | 1545713 | 2013 | 12 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Enhancement of antibody fragment secretion into the Escherichia coli periplasm by co-expression with the peptidyl prolyl isomerase, FkpA, in the cytoplasm
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
m.o.i.ChaperonesPVDFIPTGscFvHRPEC50TMBPPIaseSDSPeptidyl prolyl cis-trans isomeraseCFUPBSHuman insulin receptorShine–Dalgarno sequence3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine - 3،3 '، 5،5'-تترامیلیل بنزیدینBSA - BSAbovine serum albumin - آلبومین سرم گاوisopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside - ایزوپروپیل β-D-1-thiogalactopyranosideBacteria - باکتریEnzyme-linked immunosorbent assay - تست الیزاELISA - تست الیزاSurface plasmon resonance - تشدید پلاسمون سطحیSPR - تشدید پلاسمون سطحیDissociation constant - حد تفکیکstandard error of the mean - خطای استاندارد میانگینRoom temperature - دمای اتاقsodium dodecyl sulfate - سدیم دودسیل سولفاتcytoplasm - سیتوپلاسمFab - فابphosphate buffer saline - فسفات بافر شورfragment crystallizable - قطعه قابل برداشتنsingle-chain variable fragment - قطعه متغیر تک زنجیره ایvariable heavy - متغیر سنگینSEM - مدل معادلات ساختاری / میکروسکوپ الکترونی روبشیPhage display - نمایش فاژیvariable light - نور متغیرhalf maximal effective concentration - نیمه حداکثر غلظت موثرcolony-forming units - واحدهای تشکیل دهنده کلنیpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازHorseradish peroxidase - پراکسیداز هوررادیشpolyethylene glycol - پلی اتیلن گلیکولPolyvinylidene fluoride - پلی وینیلیدین فلورایدPEG - پلیاتیلن گلیکول multiplicity of infection - چندین عفونتoptical density - چگالی نوری
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیوتکنولوژی یا زیستفناوری
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Improper protein folding or aggregation can frequently be responsible for low expression and poor functional activity of antibody fragments secreted into the Escherichia coli periplasm. Expression issues also can affect selection of antibody candidates from phage libraries, since antibody fragments displayed on phage also are secreted into the E. coli periplasm. To improve secretion of properly folded antibody fragments into the periplasm, we have developed a novel approach that involves co-expressing the antibody fragments with the peptidyl prolyl cis-trans isomerase, FkpA, lacking its signal sequence (cytFkpA) which consequently is expressed in the E. coli cytosol. Cytoplasmic expression of cytFkpA improved secretion of functional Fab fragments into the periplasm, exceeding even the benefits from co-expressing Fab fragments with native, FkpA localized in the periplasm. In addition, panning and subsequent screening of large Fab and scFv naïve phage libraries in the presence of cytFkpA significantly increased the number of unique clones selected, as well as their functional expression levels and diversity.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 394, Issues 1â2, 30 August 2013, Pages 10-21
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 394, Issues 1â2, 30 August 2013, Pages 10-21
نویسندگان
Raphael Levy, Kiran Ahluwalia, David J. Bohmann, Hoa M. Giang, Lauren J. Schwimmer, Hassan Issafras, Nithin B. Reddy, Chung Chan, Arnold H. Horwitz, Toshihiko Takeuchi,