کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8422333 | 1545945 | 2014 | 8 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Protein complex purification from Thermoplasma acidophilum using a phage display library
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
SECscFvIMACNi–NTAMS/MS - MS / MSThermoplasma acidophilum - Thermoplasma اسیدوفیلمTandem affinity purification - تصفیه وابستگی دو طرفهTAP - ضربه زدنTandem mass spectrometry - طیف سنجی جرمی پشت سر هم یا متوالیsingle-chain variable fragment - قطعه متغیر تک زنجیره ایElectron microscopy - میکروسکوپ الکترونیProtein complex - پروتئین پیچیدهPhage display library - کتابخانه نمایش PhageSize exclusion chromatography - کروماتوگرافی اندازهای طردیimmobilized metal affinity chromatography - کروماتوگرافی وابسته به فلز متمرکز
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیوتکنولوژی یا زیستفناوری
پیش نمایش صفحه اول مقاله

چکیده انگلیسی
We developed a novel protein complex isolation method using a single-chain variable fragment (scFv) based phage display library in a two-step purification procedure. We adapted the antibody-based phage display technology which has been developed for single target proteins to a protein mixture containing about 300 proteins, mostly subunits of Thermoplasma acidophilum complexes. T. acidophilum protein specific phages were selected and corresponding scFvs were expressed in Escherichia coli. E. coli cell lysate containing the expressed His-tagged scFv specific against one antigen protein and T. acidophilum crude cell lysate containing intact target protein complexes were mixed, incubated and subjected to protein purification using affinity and size exclusion chromatography steps. This method was confirmed to isolate intact particles of thermosome and proteasome suitable for electron microscopy analysis and provides a novel protein complex isolation strategy applicable to organisms where no genetic tools are available.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Microbiological Methods - Volume 98, March 2014, Pages 15-22
Journal: Journal of Microbiological Methods - Volume 98, March 2014, Pages 15-22
نویسندگان
Ágnes Hubert, Yasuo Mitani, Tomohiro Tamura, Marius Boicu, István Nagy,