کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
8419472 | 1545739 | 2011 | 9 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Generation of recombinant guinea pig antibody fragments to the human GABAC receptor
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
PBS with 0.05% Tween 20scFvsPBSRT-PCRCDRPBSTHRPcDNA - cDNAPeptide antigen - آنتی ژن پپتیدenzyme linked immunosorbent assay - آنزیم تست ایمونوسیورسانس مرتبط استEDTA - اتیلن دی آمین تترا استیک اسید Ethylenediaminetetraacetic acid - اتیلینیدامین تتراستیک اسیدγ-aminobutyric acid - اسید γ-آمینوبوتیریکImmunization - ایمن سازیimmunoglobulin - ایمونوگلوبولینELISA - تست الیزاbase pairs - جفت پایهFab - فابFabs - فابسPhosphate buffered saline - فسفات بافر شورComplementarity determining regions - مناطق تکمیل کنندهPhage-display - نمایش فایگReverse transcriptase-polymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای واکنش زنجیره ای واکنش زنجیره ایpolymerase chain reaction - واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR - واکنش زنجیرهٔ پلیمرازHorseradish peroxidase - پراکسیداز هوررادیشPoly(ethylene glycol) - پلی اتیلن گلایکول PEG - پلیاتیلن گلیکول kilobase - کیلوبایزGABA - گابا
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیوتکنولوژی یا زیستفناوری
پیش نمایش صفحه اول مقاله

چکیده انگلیسی
To generate monoclonal antibodies to the human Ï1 GABAC receptor, a ligand-gated chloride ion channel that is activated by the neurotransmitter γ-aminobutyric acid (GABA), we recovered the immunoglobulin variable heavy chain (VH) and light chain (VL) regions of a guinea pig immunized with a 14-mer peptide segment of the N-terminal extracellular domain of the Ï1 subunit. Oligonucleotide primers were designed and used to amplify the VH and VL regions of guinea pig RNA by the reverse transcriptase polymerase chain reaction. The amplified and cloned VH and VL regions were transferred together into a phagemid vector, yielding a library of 5 Ã 106 members, which displayed chimeric fragments of antigen binding (Fabs) with guinea pig variable and human constant regions fused to protein III of M13 bacteriophage. Through affinity selection of this phage-display library with the biotinylated 14-mer peptide segment of GABAC, we isolated four different antibody fragments that bound specifically to the immunogenic peptide. Phage particles displaying two of these antibodies, but not negative controls, bound selectively to the surface of neuroblastoma cells expressing the Ï1 GABAC receptor. Such antibody fragments will be useful in future studies involving targeting of specific neural tissues that express the GABAC receptor.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 368, Issues 1â2, 31 May 2011, Pages 36-44
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 368, Issues 1â2, 31 May 2011, Pages 36-44
نویسندگان
Adnan Memic, Veronica V. Volgina, Hélène A. Gussin, David R. Pepperberg, Brian K. Kay,