کد مقاله | کد نشریه | سال انتشار | مقاله انگلیسی | نسخه تمام متن |
---|---|---|---|---|
9902327 | 1545800 | 2005 | 11 صفحه PDF | دانلود رایگان |
عنوان انگلیسی مقاله ISI
Asparaginase display of polypeptides in the periplasm of Escherichia coli: Potential rapid pepscan technique for antigen epitope mapping
دانلود مقاله + سفارش ترجمه
دانلود مقاله ISI انگلیسی
رایگان برای ایرانیان
کلمات کلیدی
TTPAsparaginase - آسپاراژینازsodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis - الکتروفورز ژل دوده سولفات سدیم پلی آکریل آمیدSDS-PAGE - الکتروفورز ژل پلی آکریل آمیدEpitope - اپیتوپELISA - تست الیزاEnzyme-linked immunosorbent assay - تست الیزاTetanus toxin - سموم تتراVascular endothelial growth factor - فاکتور رشد اندوتلیال عروقیVascular Endothelial Growth Factor (VEGF) - فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF)surface display - نمایش سطحVaccine - واکسنAntibody - پادتَن یا آنتیبادیcholesteryl ester transfer protein - پروتئین انتقال پروتئین کلسترول است
موضوعات مرتبط
علوم زیستی و بیوفناوری
بیوشیمی، ژنتیک و زیست شناسی مولکولی
بیوتکنولوژی یا زیستفناوری
پیش نمایش صفحه اول مقاله
چکیده انگلیسی
Asparaginase of Escherichia coli, a tetramer of identical subunits, was tested as a vector to display linear peptides on the surface of each enzyme subunit. A recombinant gene encoding a chimeric protein composed of asparaginase, a tetanus toxin peptide (TTP) spacer (831-854 fragment), and the foreign cholesteryl ester transfer protein C-terminal fragment (CETPC) was expressed and targeted to the periplasm of E. coli. The purified chimeric enzyme exhibited approximately 83% activity of the native enzyme, allowing the rapid screening of recombinant clones. In contrast, an asparaginase-CETPC fusion protein without the TTP spacer produced only about 23% activity of the native enzyme. Rats immunized with bacterial cells containing the chimeric enzymes induced CETP-specific immunoresponse. In contrast, rats inoculated with the cells expressing asparaginase only did not generate specific anti-CETP antibodies. Our study showed that asparaginase of E. coli was an effective carrier for displaying foreign peptides or epitopes. Moreover, the use of the TTP spacer appeared to play a critical role in maintaining the catalytic activity of the chimeric enzymes by redirecting the foreign CETPC peptide to the surface of the enzyme. The chimeric enzyme constructs fusing asparaginase with foreign peptides via a TTP spacer could be utilized as a rapid pepscan technique for antigen epitope mapping. The fusion protein of asparaginase-TTP-CETPC could also be useful for the development of a vaccine against atherosclerosis.
ناشر
Database: Elsevier - ScienceDirect (ساینس دایرکت)
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 299, Issues 1â2, April 2005, Pages 9-19
Journal: Journal of Immunological Methods - Volume 299, Issues 1â2, April 2005, Pages 9-19
نویسندگان
Qi Gaofu, Lin Jie, Cao Rongyue, Yang Xin, Mao Dan, Wu Jie, Shen Xiangchun, Xu Qunwei, Rouel S. Roque, Zhao Xiuyun, Liu Jingjing,